[發(fā)明專利]一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011126001.2
• 申請日: 2020-10-20
• 公開（公告）號: CN112715747A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳信
• 申請（專利權(quán)）人: 合肥中科亮視醫(yī)學(xué)科技有限公司
• 主分類號: A23K10/12
• 分類號: A23K10/12;A23K10/14;A23K10/18;A23K10/20;A23K10/30;A23K20/10;A23K20/142;A23K20/147;A23K20/163;A23K20/174;A23K20/20;A23K20/22;A23K20/24;A23K
• 代理公司: 深圳至誠化育知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44728
• 代理人: 劉英

1.一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，通過以下步驟制備而成：

(1)：按一定比例稱取所用中草藥殘枝，去除雜質(zhì)后曬干混合粉碎；

(2)：對發(fā)酵前中草藥中殘枝成份分析以及生物學(xué)功能性分析；

(3)：按中草藥、水、營養(yǎng)鹽重量比為2∶8∶6混合，升溫至95～100℃浸泡2～4小時，進(jìn)行中藥水溶活性物質(zhì)浸提和滅菌；

(4)從相應(yīng)的中草藥殘枝分離和篩選適用于發(fā)酵的菌株，通過16S rDNA鑒定其菌屬，測定纖維素酶、木質(zhì)素酶、木聚糖酶、蛋白酶和淀粉酶的活性，檢測分離菌株的溶血性和抗生素耐性等，確立篩選菌株在以相應(yīng)中草藥殘枝為底物的成長曲線以及pH和還原糖的變化；

(5)：將步驟(4)中篩選的菌種加入到發(fā)酵罐中，并向發(fā)酵罐中加入營養(yǎng)物，混勻后得到發(fā)酵培養(yǎng)基；

(6)：發(fā)酵結(jié)束后對發(fā)酵液進(jìn)行過濾，得到的過濾液加入到濃縮機(jī)中，將濾渣與濃縮液進(jìn)行烘干得到塊狀抗生素替代物，將塊狀抗生素替代物粉碎即可得到產(chǎn)品；

(7)對發(fā)酵后中草藥中殘枝成份分析以及生物學(xué)功能性分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，所述中草藥殘枝包括杜仲15-29份、黃芪10-20份、藤茶25-35份、桑樹16-31份、梔子10-21份。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，所述中草藥殘枝的組分及重量成分組成包括：杜仲16份、黃芪14份、藤茶26份、桑樹24份、梔子20份。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，所述中草藥殘枝的組分及重量成分組成包括：杜仲18份、黃芪20份、藤茶27份、桑樹25份、梔子10份。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，所述中草藥殘枝的組分及重量成分組成包括：杜仲17份、黃芪18份、藤茶25份、桑樹27份、梔子13份。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，所述步驟(4)中的營養(yǎng)物由糖類、蛋白胨、生長因子、牛肉膏和無機(jī)鹽類組成，重量比為1：0.35-0.5：0.6-0.8：0.3-0.45：0.2-0.3，所述糖類包括：葡萄糖、蔗糖，所述生長因子包括維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶，所述無機(jī)鹽類包括鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，步驟(5)中發(fā)酵的pH值為7.0-7.3，發(fā)酵溫度為29℃-31℃。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，步驟(5)中采用反復(fù)半分批式操作進(jìn)行發(fā)酵，反復(fù)半分批式的方法為：流加操作完成后，取出部分反應(yīng)系，剩余部分重新加入一定量底物，再按流加式操作進(jìn)行。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種替代飼用抗生素的中草藥復(fù)合物智能篩選方法，其特征在于，步驟(4)中采用16S rDNA鑒定的方法為：核酸提取→基因擴(kuò)增→產(chǎn)物純化→測序反應(yīng)→序列比對。