[發明專利]一種改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法

在審

• 申請號: 202011118652.7
• 申請日: 2020-10-19
• 公開（公告）號: CN112268969A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 沈延臻;魏健;陳玉娟;陳雯雯;萬金玉;劉英;李蕓;左麗婷;劉昌榮;劉建建;郭學平
• 申請（專利權）人: 山東華熙海御生物醫藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 南京鑫智達知識產權代理事務所(普通合伙) 32440
• 代理人: 侯銘言

1.一種改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步：提取反應體系中的烷氧基改性透明質酸樣品，得到烷氧基改性透明質酸純品；

第二步：將烷氧基改性透明質酸純品進行烷氧基反應，得到用于檢測烷氧基取代度的供試品溶液；

第三步：利用氣相色譜法檢測供試品溶液，通過反應產物的量測定改性透明質酸烷氧基取代度。

2.根據權利要求1所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，所述改性透明質酸為含有烷氧基官能團的透明質酸，取代度為0.1％～40％；所述烷氧基官能團為甲氧基，乙氧基，羥丙氧基、羥乙氧基，優選為羥乙氧基。

3.根據權利要求1所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，所述第一步反應體系中的烷氧基改性透明質酸的提取方法為醇沉法或凍干法。

4.根據權利要求1所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，所述第二步中烷氧基改性透明質酸的烷氧基反應，步驟為：選擇帶橡膠環的玻璃密封瓶，取烷氧基改性透明質酸純品精密稱定，置于玻璃密封瓶中，加入己二酸，然后加入分析純鄰二甲苯與氫碘酸溶液，用帶橡膠環的聚四氟乙烯瓶塞密封，精密稱定，于烘箱中加熱，冷卻，反應完全后，取反應瓶中上清液作為供試品溶液。

5.根據權利要求4所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，所述玻璃密封瓶的耐受壓力應不小于50psi，玻璃密封瓶精密稱定，減重小于反應瓶中內容物的0.1％，且無滲漏；烘箱溫度為75～100℃，反應時間為18～30h。

6.根據權利要求4所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，所述鄰二甲苯的加入量為2ml，己二酸加入量為0.20～0.47mg/mg供試品，優選為0.24～0.36mg/mg供試品，所述氫碘酸溶液氫碘酸含量為57％，氫碘酸溶液的加入量為0.005～0.016mL/mg供試品，優選為0.0075～0.01mL/mg供試品。

7.根據權利要求1所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，所述第三步中氣相色譜法所使用的色譜柱固定相為6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷，優選的色譜柱為DB-624。

8.根據權利要求7所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，所述色譜柱的初始柱溫為40℃，維持兩分鐘，以2.5℃/min的升溫速率升至60℃，維持兩分鐘，以50℃/min的升溫速率升至210℃，維持兩分鐘；載氣流速1.5～3ml/min；進樣口溫度150℃；檢測器FID溫度250℃。

9.根據權利要求1所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，所述通過氣相色譜法檢測供試品溶液，再將檢測出來的數值通過外標法計算得到烷氧基取代度。

10.根據權利要求9所述的改性透明質酸烷氧基取代度的檢測方法，其特征在于，通過外標法計算烷氧基取代度時，以10μl～30μl碘代烷作為對照品溶液，所述對照品溶液還包括與權利要求4反應體系等量的己二酸、分析純鄰二甲苯與氫碘酸溶液，密封、搖勻取上清液。