[發明專利]一種用于治療口腔潰瘍的骨髓間充質干細胞組合物及其制備方法

在審

• 申請號: 202011113229.8
• 申請日: 2020-10-17
• 公開（公告）號: CN112245488A
• 公開（公告）日: 2021-01-22
• 發明（設計）人: 夏爽;梁杰
• 申請（專利權）人: 鄭州佐爵生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/752
• 分類號: A61K36/752;A61K36/886;A61K36/896;A61P1/02;C12N5/0775;A61K31/198;A61K33/30;A61K35/28
• 代理公司: 鄭州芝麻繪智知識產權代理事務所(普通合伙) 41191
• 代理人: 李玲玲

1.一種用于治療口腔潰瘍的骨髓間充質干細胞組合物，其特征在于，包括以下重量份的原料：骨髓間充質干細胞培養產物3-5份，葡萄柚提取物1.5-2.5份、凝膠基質10-15份、純化水50-60份；

所述骨髓間充質干細胞培養產物的制備過程如下：

(1)分離人骨髓間充質干細胞：向骨髓中加入肝素抗凝，用PBS稀釋后加入淋巴細胞分離液，離心后取中間白膜層，用PBS洗滌后進行細胞計數；

(2)將步驟(1)分離得到的細胞接種于基礎培養基中進行原代培養，每2-3天更換培養基，至細胞融合度達到85％-90％，所述基礎培養基為低糖DMEM培養基，所述低糖DMEM培養基中包含添加劑、體積分數5％的胎牛血清，所述添加劑的組成為：重組人胰島素15-20mg/mL、乳酸鋅1-5mg/mL、L-茶氨酸45-50μg/mL、聚乙烯吡咯烷酮10-15mg/mL；

(3)取步驟(2)融合度達到85％-90％的細胞經胰酶消化后收集細胞，PBS清洗，對細胞進行勻漿處理，離心取上清液，將上清液經透析袋透析，取透析袋內的溶液凍干，即得骨髓間充質干細胞培養產物。

2.根據權利要求1所述用于治療口腔潰瘍的骨髓間充質干細胞組合物，其特征在于，所述凝膠基質為聚乙烯醇。

3.根據權利要求1所述用于治療口腔潰瘍的骨髓間充質干細胞組合物，其特征在于，步驟(2)中細胞接種濃度為1-2×10⁴個/mL。

4.根據權利要求1所述用于治療口腔潰瘍的骨髓間充質干細胞組合物，其特征在于，步驟(2)中在37℃、5％CO₂的條件下進行原代培養。。

5.根據權利要求1所述用于治療口腔潰瘍的骨髓間充質干細胞組合物，其特征在于，所述透析袋的截留分子量為12KD-14KD。

6.如權利要求1至5所述用于治療口腔潰瘍的骨髓間充質干細胞組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：取凝膠基質溶解于純化水中，加入骨髓間充質干細胞培養產物和蘆薈提取物，混合均勻，輻照處理即得產品。