[發明專利]一種極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的方法

在審

• 申請號: 202011111309.X
• 申請日: 2020-10-16
• 公開（公告）號: CN112210535A
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發明（設計）人: 章幼玉;程舜;李文;柳清伙
• 申請（專利權）人: 廈門大學;廈門大學深圳研究院
• 主分類號: C12N5/079
• 分類號: C12N5/079;C12N13/00
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 鄭翰偉

1.一種極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的方法，其特征在于，其方法所采用的技術方案是：利用一種極低頻電磁場裝置對細胞進行刺激，極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的建立方法包括如下步驟：

步驟(1)：搭建一種刺激神經細胞的極低頻電磁場發生儀，包括信號發生器、功率放大器以及密繞螺線管，所述的密繞螺線管產生的電磁場強度為1mT；

步驟(2)：密繞螺線管接收信號發生器發出的脈沖信號，產生相應波形的電磁場；

步驟(3)：所述的信號發生器發出的信號頻率是50Hz、電流為0.3A；

步驟(4)：所述的功率放大器放大倍數是10倍；

步驟(5)：培養SH-SY5Y神經細胞至對數期備用；

步驟(6)：將所述對數期SH-SY5Y神經細胞分成若干組，分別是對照組細胞和實驗組細胞；

步驟(7)：所述極低頻電磁場刺激SH-SY5Y神經細胞,在細胞培養期間，用極低頻脈沖電磁場刺激SH-SY5Y神經細胞，信號頻率為50Hz，磁感應強度為1mT；

步驟(8)：分別取上述步驟(7)電磁場刺激后細胞進行細胞活性實驗、細胞增殖實驗和細胞分化實驗，以檢測刺激后細胞的活性大小、增殖速度和分化程度。

2.根據權利要求1所述一種極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的方法，其特征在于，所述步驟(1)具體包括：將脈沖信號發生器的信號輸出端與功率放大器的輸入端相連，通過功率放大器放大脈沖信號發生器的輸出電流，將功率放大器的輸出端與密繞螺線管相連。

3.根據權利要求1所述一種極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的方法，其特征在于，所述步驟(3)具體包括：將脈沖信號發生器的信號頻率設置為50Hz、輸出電流為0.3A，脈沖電磁場輸出頻率為50Hz、電流強度為0.3A的脈沖波形。

4.根據權利要求1所述的一種極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的方法的分子檢測方法，其特征在于，所述步驟(4)具體包括：功率放大器輸入端接收脈沖信號發生器傳送過來的信號，將功率放大器的放大倍數調為10倍，功率放大器將接收來的信號放大10倍后通過輸出端輸出。

5.如權利要求1所述一種極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的方法的分子檢測方法，其特征在于，所述步驟(5)具體包括：密繞螺線管產生頻率為50Hz、磁場強度為1mT的極低頻的電磁場。

6.如權利要求1所述一種極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的方法的分子檢測方法，其特征在于，所述步驟(7)具體包括：將所述對數期SH-SY5Y神經細胞用0.25％胰酶消化、1000rpm,3分鐘離心3min，收集細胞，正常DMEM培養液重懸，并將細胞密度調整為大約2×10⁶細胞/毫升；

將所述調整好密度的細胞分成6組，分別為對照組和實驗組，接種于培養皿中，每組設3個平行樣本，置于37℃培養箱中，培養24h后棄去舊培養基。

7.如權利要求1所述一種極低頻電磁場誘導的促神經細胞生長和交聯的方法的分子檢測方法，其特征在于，所述步驟(8)具體包括：取上述步驟(7)中實驗組細胞和對照組細胞，用極低頻電磁場發生儀產生的頻率50Hz、磁場強度為1mT的電磁場刺激三組實驗組細胞2h；觀察細胞活性、增殖和分化情況。