[發明專利]一種抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試劑盒的使用方法

在審

• 申請號: 202011109084.4
• 申請日: 2020-10-16
• 公開（公告）號: CN112285343A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 耿文君
• 申請（專利權）人: 黑龍江迪安醫學檢驗所有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N21/78
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

本發明公開了一種抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試劑盒的使用方法，屬于抗體檢測技術領域。本發明解決現有抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試劑盒的校準品及樣本檢測結果準確度低的問題。本發明通過改變了酶結合物的稀釋方法與現有稀釋方法相比較，標準品較靶值偏倚大幅縮小，更接近要求數值，提高了檢測結果的準確度，使患者樣本結果更符合臨床。

技術領域

本發明涉及一種抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試劑盒的使用方法，屬于抗體檢測技術領域。

背景技術

抗心磷脂抗體(ACL)屬于以血小板和內皮細胞膜上帶負電荷的心磷脂作為靶抗原的自身抗體。常見于系統性紅斑狼瘡(SLE)及其他自身免疫性疾病。該抗體與血栓形成。血小板、自然流產或宮內死胎關系密切。

現有檢測抗心磷脂抗體的方法有金標和化學發光檢測抗體，只能作簡單的定性，而化學發光法需用專門的專用儀器，而對于血清中游離抗體的檢測現大多用酶聯免疫吸附法(ELISA)，這種方法特異性和敏感性均較高且無須特殊儀器，即可定性又可定量，可檢測抗體類及亞類，易于標準化，具有操作簡單、結果正確、省時等優點。但是現有心磷脂抗體ELISA檢測試劑盒定量檢測ACA結果的校準品及樣本結果偏低，弱陽性校準品陰性，患者出現假陰性結果，與臨床不符，因此提高抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試結果的準確度及穩定性是十分必要的。

發明內容

本發明為了解決現有抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試劑盒的校準品及樣本檢測結果準確度低的問題，提供一種抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試劑盒的使用方法。

一種抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試劑盒的使用方法，該方法包括以下步驟：

步驟一、將樣本、校準品、陽性對照、陰性對照、酶結合物、樣本緩沖液、清洗緩沖液、色原/底物液和終止液由2～8℃平衡到室溫；

步驟二、稀釋樣本：使用樣本緩沖液稀釋樣本；

步驟三、樣本溫育：按加樣方案向相應微孔分別加100μL校準品、陽性對照、陰性對照或稀釋后的樣本，在室溫下溫育30min；

步驟四、清洗：然后采用洗板機使用清洗緩沖液清洗3次，每次浸泡40s，清洗完畢后在吸水紙上拍打除去殘存洗液；

步驟五、酶結合物溫育：然后每個微孔先加入100μL樣本緩沖液，再加入10μL酶結合物，使用旋渦混合器混勻，在室溫下溫育30min；

步驟六、清洗：具體操作與步驟四相同；

步驟七、色原/底物液溫育：清洗完成后每個微孔滴加100μL色原/底物液，室溫避光溫育15min；

步驟八、終止反應：色原/底物液溫育結束后，每個微孔加入100μL終止液，混勻后，酶標儀比色，計算結果。

進一步地，室溫為18～25℃。

進一步地，抗心磷脂抗體lgA/G/M檢測試劑盒由歐蒙醫學診斷(中國)有限公司生產。

進一步地，步驟二中血漿和血清樣本與樣本緩沖液的比例為1：201。

進一步地，加樣方案如下表所示：