[發明專利]桑黃菌激光脈沖強光聯合誘變菌株及其超聲強化發酵方法

有效

• 申請號: 202011098808.X
• 申請日: 2020-10-14
• 公開（公告）號: CN112300948B
• 公開（公告）日: 2021-10-12
• 發明（設計）人: 馬海樂;董亞婷;任曉鋒
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N13/00;C12P19/04;C12P17/06;C12R1/645
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本發明公開了桑黃菌激光脈沖強光聯合誘變菌株及其超聲強化發酵方法，屬于食品加工技術領域。桑黃菌菌株保藏編號為：CGMCC NO.17078，建議的分類命名為：鮑氏針層孔菌Inonotus baumii。本發明還公開了桑黃菌激光脈沖強光聯合誘變菌株的超聲強化發酵方法，與出發菌株比較，本發明誘變菌株JQ9發酵菌絲體產量提高了46.6％，菌絲體多糖、黃酮、多酚和三萜的產量分別提高了27.17％、68.18％、60.73％和3.6％。本發明的兩段式超聲波強化，兼顧了多糖和黃酮兩種活性成分產量和含量的提升。與無超聲比較，多糖和黃酮的產量分別提高了15.86％和45.04％，菌絲體多糖和黃酮的含量分別提高了25.15％和56.68％。

技術領域

本發明屬于食品加工技術領域，特別涉及桑黃菌激光脈沖強光聯合誘變菌株及其超聲強化發酵方法。

背景技術

桑黃菌作為我國稀有大型真菌，具有明顯的藥用價值，并廣泛應用于韓國、日本。桑黃的藥用特性最早記載于《本草綱目》中，自古就有“如果得到附著在桑樹上的黃色疙瘩，死人也可以復活”的說法，現代藥理學研究證明桑黃菌具有多種藥理作用。研究指出桑黃菌多糖、黃酮、粗三萜類化合物具有多種生物活性。近些年來桑黃的研究備受關注。尤其是桑黃菌多糖具有明顯的抗腫瘤、抗癌等功效，同時具有明顯的抗氧化、免疫調節等活性。但桑黃菌本身的生物學特性決定了桑黃菌在自然及人工栽培的條件下生長速度緩慢，因此很難滿足醫藥需求；相關研究指出桑黃菌發酵菌絲體較子實體含有豐富的多糖、黃酮和多種有益礦物元素，并指出發酵菌粉同樣具有開發價值。因此通過工業發酵獲得桑黃菌菌絲體，是獲取更多資源的途徑之一。因此，通過研究桑黃菌液態深層培養條件來開發一種新穎，高效同時獲得桑黃菌多糖和黃酮產物的方法成為備受關注的課題。

近年來，高強度超聲波作為一種經濟、簡單、有效的工業手段經常被用來提高活細胞生物產量和以及代謝酶和一些次級代謝產物的量。有研究表明超聲處理在促進細菌、真菌和植物培養過程中產生有價值產物起著重要的作用。本課題組曾經開展過利用超聲波強化桑黃菌發酵，提高多糖產量的研究(張赫男.桑黃菌的物理誘變及其超聲輔助發酵研究.江蘇大學博士學位論文，2014)。研究結果表明，在發酵第3.8天、超聲時間65min的條件下，多糖產量值為1.8g/L。但是這個方案沒有考慮黃酮產量提升促進的問題。迄今為止通過利用超聲波同時提高桑黃菌菌絲發酵胞內多糖和黃酮產量的文章或專利尚未見報道。

發明內容

本發明的目的是提供桑黃菌激光脈沖強光聯合誘變菌株及其超聲強化發酵方法。

實現本發明的技術如下：

為實現上述目的，本發明采取的技術方案為：

桑黃菌激光脈沖強光聯合誘變菌株及其超聲強化發酵方法按照下述步驟進行：

在桑黃菌菌株(Phellinus igniarius JQ9)接種后，在26℃下進行發酵，總發酵時間是10天。第一段超聲處理的目的是提高多糖的產量，處理條件為：在發酵的第2～6天施加超聲波，每天施加2次，共處理5天，每次施加時長15min、超聲頻率為(20+40)kHz雙頻組合、超聲功率密度40W/L、超聲波間歇比為10:3；第二階超聲處理的目的是提高黃酮的產量，處理條件為：在發酵的第7～9天施加超聲波，每天施加超聲1次，共處理3天；每次時長10min，頻率組合(20+40)kHz、功率密度120W/L、間歇比10:7。結束發酵后，對發酵液中的菌絲體、菌絲體多糖和黃酮分別進行提取與分析檢測。

上述桑黃菌菌株(Phellinus igniarius JQ9)，保藏編號：CGMCC NO.17078；保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號；保藏日期：2019年3月6日；建議的分類命名為：鮑氏針層孔菌Inonotus baumii。

本發明的優點，表現在：