[發(fā)明專(zhuān)利]一種脂蛋白a檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011087841.2
• 申請(qǐng)日: 2020-10-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112255421B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚曉娟;黎法颶
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京永基恒聲科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/92
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/92;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 濰坊諾誠(chéng)智匯知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37309
• 代理人: 榮曉宇

1.一種脂蛋白a檢測(cè)試劑盒，包括試劑R1、試劑R2和校準(zhǔn)品，其特征在于，所述的試劑R1包括第一緩沖液50～250mmol/L、抗干擾劑1～2wt％、促進(jìn)劑1～2.5wt％、防腐劑0.01～0.1wt％；所述的試劑R2包括第二緩沖液50～250mmol/L、穩(wěn)定劑0.5～5wt％、抗人脂蛋白a單克隆抗體包被膠乳顆粒0.1～2g/L、防腐劑0.02～0.2wt％；

所述的抗干擾劑為麥角硫因和TCEP-HCl以1:(1～2)的質(zhì)量比組成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂蛋白a檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的第一緩沖液、第二緩沖液各自獨(dú)立地選自MOPS緩沖液、4-羥乙基哌嗪乙磺酸緩沖液、磷酸鹽緩沖液、甘氨酸緩沖液、三羥甲基氨基甲烷緩沖液、Tris-HCl緩沖液中的至少一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂蛋白a檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的抗干擾劑為麥角硫因和TCEP-HCl以1:1.5的質(zhì)量比組成。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂蛋白a檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的穩(wěn)定劑選自甘露寡聚糖、羧甲基葡聚糖、蔗糖、海藻糖、甘油、甘露醇、山梨醇中的至少一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的脂蛋白a檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的穩(wěn)定劑為甘露寡聚糖和甘油以質(zhì)量比1:(2～4)的質(zhì)量比組成。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂蛋白a檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的促進(jìn)劑為聚乙二醇6000、聚乙二醇8000、吐溫-20或吐溫-80；所述的防腐劑為Proclin300或NaN₃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂蛋白a檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的抗人脂蛋白a單克隆抗體包被膠乳顆粒中抗人脂蛋白a單克隆抗體和膠乳顆粒共價(jià)結(jié)合，其中，抗人脂蛋白a單克隆抗體為羊抗人、鼠抗人或兔抗人脂蛋白a單克隆抗體；膠乳顆粒為表面帶有羧基的聚苯乙烯膠乳顆粒，顆粒的粒徑為50～300nm。

8.一種用于非疾病診斷治療目的的利用權(quán)利要求1-7任一所述的試劑盒檢測(cè)脂蛋白a含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取待測(cè)樣品，加入所述試劑R1，反應(yīng)4～6min后，加入所述試劑R2混勻，讀取吸光度A1，繼續(xù)反應(yīng)4～6min后，讀取吸光度A2，計(jì)算ΔA＝A2-A1；

(2)使用所述脂蛋白a校準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，并根據(jù)ΔA和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到待測(cè)樣品中脂蛋白a的含量。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測(cè)脂蛋白a含量的方法，其特征在于，所述的待測(cè)樣品、試劑R1和試劑R2的體積比為2:(120～180):(30～60)，反應(yīng)溫度為37℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為600nm。