[發明專利]T細胞抗原受體、其多聚體復合物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202011080186.8
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN113621048A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 賈樂梅;陳花;李文忠;王嘉盛;雷蕾;劉芳;趙學強;林欣
• 申請（專利權）人: 華夏英泰（北京）生物技術有限公司;清華大學
• 主分類號: C07K14/725
• 分類號: C07K14/725;C12N15/12;C12N5/10;A61K39/00;A61K35/17;A61P35/00;A61P31/22
• 代理公司: 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 徐丹丹;張丹

1.一種T細胞抗原受體，其特征在于，所述的T細胞抗原受體特異性結合EBV潛伏期膜蛋白LMP2，其中，所述LMP2的結合表位包含SEQ ID NO：5或6。

2.根據權利要求1所述的T細胞抗原受體，其特征在于，其包含α鏈的CDR1α-CDR3α和β鏈的CDR1β-CDR3β，其中，CDR1α的氨基酸序列如SEQ ID NO：31所示或與SEQ ID NO：31所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR2α的氨基酸序列如SEQ ID NO：32所示或與SEQ ID NO：32所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR3α的氨基酸序列如SEQ ID NO：33所示或與SEQID NO：33所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR1β的氨基酸序列如SEQ ID NO：34所示或與SEQ ID NO：34所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR2β的氨基酸序列如SEQ IDNO：35所示或與SEQ ID NO：35所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR3β的氨基酸序列如SEQ ID NO：36所示或與SEQ ID NO：36所示氨基酸序列具有至少80％同源性；

優選的，所述的CDR1α-CDR3α及CDR1β-CDR3β選自下列任一組：

；

更優選的，所述的α鏈的氨基酸序列如SEQ ID NO：28所示，或與SEQ ID NO：28所示氨基酸序列具有至少80％同源性；所述的β鏈的氨基酸序列如SEQ ID NO：27所示，或與SEQ IDNO：27所示氨基酸序列具有至少80％同源性；

最為優選的，所述T細胞抗原受體的氨基酸序列如SEQ ID NO：19所示或與SEQ ID NO：19所示氨基酸序列具有至少80％同源性。

3.一種核酸，其特征在于，所述的核酸編碼權利要求1-2任一所述的T細胞抗原受體。

4.一種表達載體，其特征在于，所述的表達載體包含權利要求3所述的核酸。

5.一種宿主細胞或免疫細胞，其特征在于，所述的宿主細胞包含權利要求3所述的核酸或權利要求4所述的表達載體，所述的免疫細胞表達權利要求1-2任一所述的T細胞抗原受體。

6.一種重組T細胞的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)從陽性T細胞克隆得到權利要求3的核酸序列；

2)分離、培養原代T細胞；

3)將步驟1)得到的核酸序列遞送至步驟2)所述的原代T細胞中，獲得表達權利要求1-2任一所述T細胞抗原受體的重組T細胞。

7.一種T細胞抗原受體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)從陽性T細胞克隆得到權利要求3的核酸序列；

(2)將步驟(1)得到的核酸序列連接至載體骨架，獲得表達載體；

(3)將步驟(2)獲得的表達載體轉化至宿主細胞，然后誘導其表達；

(4)獲得T細胞抗原受體。

8.一種多聚體復合物，其特征在于，所述多聚體復合物包含權利要求1-2任一所述的T細胞抗原受體。

9.根據權利要求8所述的多聚體復合物，其特征在于，所述多聚體復合物還包括單體，生物素分子，以及鏈霉親和素分子或親和素分子，其中，所述單體包括MHC分子α鏈胞外區和β2m鏈及抗原肽，所述單體與所述生物素分子偶聯，所述生物素分子與所述鏈霉親和素或親和素分子結合；優選的，所述的抗原肽包含SEQ ID NO：5或6，所述的MHC分子為HLA-A*2402。