[發明專利]鼠抗人AFP單克隆抗體及應用

在審

• 申請號: 202011079045.4
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN112210006A
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發明（設計）人: 湯石明;楊滿霞;郭利明
• 申請（專利權）人: 天津賽爾生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C12N5/20;G01N33/574;C12R1/91
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

本發明公開了鼠抗人AFP單克隆抗體及應用，鼠抗人AFP單克隆抗體由保藏日為2017年2月22日、保藏號為CGMCC No.13801的分泌AFP單克隆抗體雜交瘤細胞338c3a3a9產生；試驗驗證，本發明的雜交瘤細胞338c3a3a9產生的鼠抗人AFP單克隆抗體可應用于蛋白免疫印跡、免疫熒光和免疫組化等實驗技術中，特異性強、靈敏度高。從而提供了有效檢測AFP的檢測工具。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，特別是涉及一種單克隆抗體及應用。

背景技術

原發性肝癌是最常見的惡性腫瘤之一，其惡性程度高，進展快，預后差，是世界第六大常見惡性腫瘤。就死亡率而言，肝癌在我國高居第二位，且呈上升趨勢。近年來隨著各種肝癌治療手段的廣泛應用，肝癌患者的生存率有所提高，早發現、早診斷、早治療對于改善肝癌患者的預后具有非常重要的意義。肝癌患者的診斷，大多依據臨床診斷標準，血清中的甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)作為原發性肝癌相對特異的腫瘤標志物，是重要的實驗室診斷依據之一，臨床上也常使用AFP作為原發性肝癌患者治療效果的檢測指標。

AFP是一種結構與人類血清白蛋白類似的酸性糖蛋白，其分子量為68KD，主要合成部位是嚙齒類動物及人類胚胎的肝臟，但也可在卵黃囊及胃腸道合成。從胎兒出生3個月開始，含量逐漸下降直至出生第二年達到成人體內水平。在成人體內，AFP基因表達并未完全關閉，血清中含量極低。但是當成人處于病理或者肝臟損傷情況時，AFP含量會明顯增高，這也是肝癌患者體內甲胎蛋白含量升高的原因。

診斷肝癌的技術手段主要集中在影像學技術。超聲檢查是最早應用于肝癌診斷的技術，但是其優勢主要是在肝癌中晚期，而在早期診斷中的可靠性較差。自從Abelev發現AFP以及Ruoshlati和Seppala研發了針對AFP的定量分析以來，AFP作為肝癌的分子診斷標準被肯定并長期應用于臨床。目前雖然開發了許多肝癌的血清學標志物，但仍局限于某些實驗室中而并未大規模用于普查中，AFP依然是診斷原發性肝癌應用最為廣泛的血清標志物。中國癌癥協會報道正常人血清AFP濃度低于20ng/mL。而原發性肝癌患者血清AFP多數在500ng/mL左右。在排除活動性肝病，生殖腺胚胎瘤以及妊娠的情況下，血清中AFP含量高于400ng/mL持續四周，或者高于200ng/mL持續八周，即可診斷為原發性肝癌。AFP對原發性肝癌的臨床診斷價值可以歸納為：⑴是一種僅次于病理檢查的診斷方法；⑵為目前最好的早期診斷方法之一，可在臨床癥狀出現前8-11個月作出診斷；⑶為反應病情變化和治療效果的敏感指標；⑷有助于檢出亞臨床期，復發性和轉移性肝癌。

AFP的檢測方法報道很多，比較成熟的是化學發光免疫，酶聯免疫吸附(ELISA)、電化學發光等，而這些技術都依賴于優質的AFP抗體。對于AFP單克隆抗體的研制，國內外均有報道，但對其在檢測中的特異性及靈敏度的提高尚需進一步研究。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種特異性好，靈敏度高的鼠抗人AFP單克隆抗體。

本發明的第二個目的是提供含有上述鼠抗人AFP單克隆抗體的免疫熒光檢測試劑。

本發明的第三個目的是提供含有上述鼠抗人AFP單克隆抗體的免疫印跡檢測試劑。

本發明的第四個目的是提供含有上述鼠抗人AFP單克隆抗體的免疫組化檢測試劑。

本發明的第五個目的是提供鼠抗人AFP單克隆抗體在制備用于檢測人腫瘤組織和細胞樣品中甲胎蛋白的免疫印跡檢測試劑、免疫熒光檢測試劑或免疫組化檢測試劑中的應用。

本發明的第六個目的是提供一種分泌AFP單克隆抗體雜交瘤細胞。

本發明的技術方案概述如下：

一種鼠抗人AFP單克隆抗體，由保藏日為2017年2月22日、保藏號為CGMCCNo.13801的分泌AFP單克隆抗體雜交瘤細胞338c3a3a9產生。