[發(fā)明專利]一種DNA框架包裹的G-四鏈體結(jié)構(gòu)及其制備方法與應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011071468.1
• 申請(qǐng)日: 2020-10-09
• 公開（公告）號(hào): CN112226487A
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于艷艷;朱敏;蘇高星
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南通大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6806
• 分類號(hào): C12Q1/6806;C12Q1/6818;C12N15/11
• 代理公司: 北京匯捷知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11531
• 代理人: 趙艷

1.一種DNA框架包裹的G-四鏈體結(jié)構(gòu)，其特征在于，該G-四鏈體結(jié)構(gòu)包括由DNA鏈構(gòu)成的可進(jìn)入細(xì)胞的框架結(jié)構(gòu)以及包裹在該框架結(jié)構(gòu)內(nèi)的以miR-122a作為靶標(biāo)的線性G-四鏈體探針，所述探針兩端分別固定在框架一對(duì)角位置的邊框上，所述探針中部斷開以分別修飾Cy3和Cy5；其中，在靶序列miR-122a缺失的情況下，僅出現(xiàn)來(lái)自Cy3的綠色熒光；當(dāng)靶序列存在時(shí)，則能夠促進(jìn)熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)過(guò)程，使得Cy3熒光減弱的同時(shí)Cy5熒光增強(qiáng)。

2.如權(quán)利要求1所述的DNA框架包裹的G-四鏈體結(jié)構(gòu)，其特征在于，所述框架結(jié)構(gòu)具體為10×21×21個(gè)堿基構(gòu)成的DNA框架。

3.權(quán)利要求1或2所述的DNA框架包裹的G-四鏈體結(jié)構(gòu)的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：將組裝框架結(jié)構(gòu)所需的6條DNA序列、構(gòu)成G-四鏈體探針?biāo)璧腃y3序列和Cy5序列以終濃度為0.6μM在緩沖液中混合均勻，將樣品放入PCR儀中在3.5小時(shí)內(nèi)從95℃退火到4℃，得到G-四鏈體結(jié)構(gòu)。

4.權(quán)利要求1或2所述的DNA框架包裹的G-四鏈體結(jié)構(gòu)在作為miR-122a的檢測(cè)物中的應(yīng)用。

5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，該DNA框架包裹的G-四鏈體結(jié)構(gòu)在作為細(xì)胞內(nèi)miR-122a的檢測(cè)物中的應(yīng)用。