[發明專利]一種新型的吸入性過敏原融合蛋白及其構建方法、應用在審
【權利要求書】:
1.一種新型的吸入性過敏原融合蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一種編碼如權利要求1所述的一種新型的吸入性過敏原融合蛋白的基因,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
4.一種含有如權利要求1所述吸入性過敏原融合蛋白的試劑盒。
5.如權利要求1所述的一種新型的吸入性過敏原融合蛋白的構建方法,其特征在于,包括以下步驟:
S1、依次連接過敏原Der P21、Der f13、Abm a 8(t)蛋白核苷酸序列獲得目的基因,其中,每相鄰兩種過敏原蛋白核苷酸序列之間加入Linker序列;
S2、在目的基因N端加入真核KOZAK序列,在上游加入限制性核酸內切酶位點Not I,在下游加入酶切位點BamH I,C端加入6*His標簽序列,獲得全序列基因;
S3、將步驟S2獲得的全序列基因與質粒進行雙酶切獲得酶切產物;
S4、將步驟S3獲得的酶切產物通過T4連接酶連接,得到重組質粒;
S5、將重組質粒在哺乳細胞中表達獲得吸入性過敏原融合蛋白。
6.根據權利要求5所述的吸入性過敏原融合蛋白的構建方法,其特征在于,還包括對吸入性過敏原融合蛋白的純化。
7.采用權利要求6所述的吸入性過敏原融合蛋白的構建方法所制備的融合蛋白。
8.如權利要求1所述的吸入性過敏原融合蛋白或如權利要求4所述試劑盒在制備免疫學診斷試劑中的應用。
9.如權利要求1所述的吸入性過敏原融合蛋白或如權利要求4所述試劑盒在制備吸入性過敏原診斷試劑中的應用。
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