[發明專利]一種紅色糖多胞菌專一噬菌體的檢測方法及預防方法

在審

• 申請號: 202011059060.2
• 申請日: 2020-09-30
• 公開（公告）號: CN112266977A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 劉力嘉;孫瑞君;朱娜;郭惠芬;張志
• 申請（專利權）人: 寧夏啟元藥業有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/06;C12R1/92
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種紅色糖多胞菌專一噬菌體的檢測方法及預防方法，該檢測方法是將培養好的紅色糖多胞菌菌絲體混入雙層平板培養基的上層培養基中，然后鋪置于已凝固的雙層平板培養基的下層培養基上，待凝固后放置于需要檢測的環境進行定點定時檢測，取回后在溫度35～37℃，濕度40～45%的條件下恒溫培養28～34h，觀察記錄結果。本發明方法可以直觀的觀察到噬菌體的存在，還可對噬菌體的數量和沉降速率進行檢測，是一種有效，快捷，簡便的紅色糖多胞菌專一噬菌體檢測方法，即適用于環境空氣的檢測，也同樣適用于液體環境檢測。本發明可以有效地防止紅色糖多胞菌專一噬菌的感染和爆發。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，特別是涉及一種紅色糖多胞菌專一噬菌體的檢測方法及預防方法。

背景技術

噬菌體是一類感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的細菌病毒的總稱。作為病毒的一種，噬菌體具有病毒特有的一些特性：個體微??；不具有完整細胞結構；只含有單一核酸，一旦離開了宿主細胞，噬菌體既不能生長，也不能復制。噬菌體個體感染一個宿主細胞后可迅速生成幾百個子代噬菌體顆粒，每個子代顆粒又可感染菌體細胞，再生成幾百個子代噬菌體顆粒。所以發酵企業一旦爆發噬菌體，就會造成停產和無法估計的經濟損失。

噬菌體繁殖速度驚人，且個體極其微小無法用肉眼觀察到，因此必須尋求一種有效且快速，并易于觀察的檢測方法對企業生產環境及研究環境進行噬菌體監測，從而極早發現并及時采取消毒等措施來杜絕其對廠區環境及實驗室的污染，徹底杜絕其爆發的可能性。

紅色糖多胞菌專一噬菌體是紅色糖多胞菌的專一噬菌體，它的爆發對于利用紅色糖多胞菌進行發酵的企業來說影響很大，因此采取一種紅色糖多胞菌專一噬菌體的檢測方法對于發現并防止噬菌體侵染具有非常重要的意義。

發明內容

本發明的目的就在于提供一種紅色糖多胞菌專一噬菌體的檢測方法，該方法可實現紅色糖多胞菌專一噬菌體的快速檢測，為及時預防噬菌體大面積爆發提供幫助。

本發明的另一目的是提供一種紅色糖多胞菌專一噬菌體的預防方法。

本發明是基于以下原理而設計：

1、通過多次試驗觀察到：在一定的培養條件下將紅色糖多胞菌孢子培養至剛剛萌發或生長為菌絲體時，細胞壁變薄，細胞結構發生變化，特別是菌絲體，它的細胞膜通透性增加，故而抗逆性會大大減弱，此時菌體對噬菌體的抗性減弱，易于被感染。

2、專一噬菌體對紅色糖多胞菌菌絲體的具有易侵染性。

本發明正是利用菌種自身生理生化特點及噬菌體侵染特點，結合簡單的實時監測方法對環境中的噬菌體進行檢測，具體為：

一種紅色糖多胞菌專一噬菌體的檢測方法，其特征在于：將培養好的紅色糖多胞菌菌絲體混入雙層平板培養基的上層培養基中，然后鋪置于已凝固的雙層平板培養基的下層培養基上，待凝固后放置于需要檢測的環境進行定點定時檢測，取回后在溫度35～37℃，濕度40～45%的條件下恒溫培養28～34h，觀察記錄結果；

所述上層培養基組成為：淀粉1.0～2.0%，蛋白胨0.1～0.3%， NaCl 0.3～0.4%，(NH4)₂SO₄ 0.2～0.3%， KNO₃ 0.1～0.2%，K₂HPO₄ 0.1～0.2%，MgSO₄·H₂O 0.04～0.06%，FeSO₄0.001%，瓊脂粉0.8～1.0%，用20～40%氫氧化鈉溶液調至pH8.0；

所述下層培養基組成為：牛肉膏 0.3～0.4%，蛋白胨0.8～1.0%，葡萄糖0.1～0.2%，NaCl 0.4～0.6%，瓊脂粉1.5～1.8%，用20～40%氫氧化鈉溶液調至pH6.8。