[發明專利]一種生物3D打印皮膚修復支架

有效

• 申請號: 202011050317.8
• 申請日: 2020-09-29
• 公開（公告）號: CN112206358B
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 牛長梅;趙偉新;楊熙;施畢旻;邵新宇;孫炳偉;郭在文;季冬東;周晨
• 申請（專利權）人: 蘇州諾普再生醫學有限公司
• 主分類號: A61L27/60
• 分類號: A61L27/60;A61L27/20;A61L27/22;A61L27/24;A61L27/52;A61L27/54;B33Y70/10;B33Y80/00
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 何明倫

1.一種生物3D打印皮膚修復支架，其特征在于，包括呈水凝膠形式的依次疊加的表皮層、真皮層和皮下組織層；

所述表皮層的水凝膠組成包括海藻酸鈉10-40mg/ml，明膠10-40mg/ml，膠原蛋白5-20mg/ml，透明質酸1-5mg/ml，彈性蛋白0.1-5mg/ml，層粘連蛋白0.1-5mg/ml，甘油50-100mg/ml；所述真皮層的水凝膠組成包括海藻酸鈉15-35mg/ml，明膠10-35mg/ml，膠原蛋白1-10mg/ml，透明質酸1-10mg/ml，甘油50-100mg/ml；所述皮下組織層的水凝膠組成包括海藻酸鈉10-30mg/ml，明膠10-30mg/ml，膠原蛋白1-10mg/ml，透明質酸1-5mg/ml；所述mg/ml指的是相應組分與配制溶液的質量體積比。

2.根據權利要求1所述的皮膚修復支架，其特征在于，所述表皮層、真皮層和皮下組織層的水凝膠中，所述海藻酸鈉的部分或全部為氧化海藻酸鈉。

3.根據權利要求1所述的皮膚修復支架，其特征在于，所述表皮層、真皮層和皮下組織層均包括抗菌成分。

4.根據權利要求1所述的皮膚修復支架，其特征在于，所述表皮層、真皮層和皮下組織層均包括生長因子，用于促進細胞在皮膚修復支架中的生長增殖；表皮層包括角質細胞生長因子(KGF)或上皮細胞生長因子(EGF)1-10ng/ml，真皮層包括成纖維細胞生長因子(FGF)10-20ng/ml，皮下組織層包括血管內皮生長因子(VEGF)0.1-1.0ng/ml；所述ng/mL指的是相應組分與配制溶液的質量體積比。

5.根據權利要求1所述的皮膚修復支架，其特征在于，還包括覆蓋在表皮上面的呈水凝膠形式的致密層，所述致密層的水凝膠組成包括海藻酸鈉15-40mg/ml，明膠10-35mg/ml，甘油50-100mg/L，透明質酸1-10mg/ml；所述mg/ml指的是相應組分與配制溶液的質量體積比。

6.根據權利要求1所述的皮膚修復支架，其特征在于，所述表皮層的水凝膠的配制方法為：將透明質酸溶于PBS中，攪拌4-6h溶解混勻，再加入海藻酸鈉、明膠、膠原蛋白、彈性蛋白、層粘連蛋白、甘油，在37℃攪拌1-4h溶解混勻，再加入KGF或EGF搖晃混勻；

所述真皮層的水凝膠的配制方法為：將透明質酸溶于PBS中，攪拌4-6h溶解混勻，再加入海藻酸鈉、明膠、膠原蛋白、甘油，37℃中攪拌1-4h溶解混勻，再加入FGF搖晃混勻；

所述皮下組織層的水凝膠的配制方法為：將透明質酸溶于PBS中，攪拌4-6h溶解混勻，再加入海藻酸鈉、明膠、膠原蛋白，37℃攪拌1-4h溶解混勻，再加入VEGF搖晃混勻。

7.根據權利要求5所述的皮膚修復支架，其特征在于，所述致密層的水凝膠的配制方法為：將透明質酸溶于PBS中，攪拌4-6h溶解混勻，再加入海藻酸鈉、明膠和甘油，37℃中攪拌1-4h溶解混勻。

8.一種制備權利要求1-7任一項所述的一種生物3D打印皮膚修復支架的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將配置好的水凝膠分別裝置在不同的打印墨盒中，按照設定好的3D打印皮膚修復支架結構進行逐層打印，依次打印表皮層、真皮層和皮下組織層；

(2)打印過程中實時霧化2％-10％氯化鈣溶液進行交聯并維持打印結構，打印完成后浸泡在氯化鈣溶液中交聯10-30min；

(3)用PBS清洗兩遍后放入-80℃中冷凍過夜，再將支架放入真空冷凍干燥機中12-48h，凍干完成后使用輻照滅菌的方式滅菌處理。