[發明專利]一種促進骨髓間充質干細胞成骨分化的方法有效
| 申請號： | 202011020657.6 | 申請日： | 2020-09-25 |
| 公開（公告）號： | CN112080463B | 公開（公告）日： | 2021-10-26 |
| 發明（設計）人： | 沈艷;于夢夢;馬超群 | 申請（專利權）人： | 深圳市曠逸生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/077 | 分類號： | C12N5/077;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 南京中高專利代理有限公司 32333 | 代理人： | 潘甦昊 |
| 地址： | 518054 廣東省深圳市前海深港合作區南*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 促進 骨髓 間充質 干細胞 分化 方法 | ||
1.一種促進骨髓間充質干細胞成骨分化的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)取人骨髓間充質干細胞于DMEM/F12培養基中進行培養，待細胞融合度達到80-90％時，用0.25％胰酶消化傳代；
(2)將上述步驟(1)傳代培養得到的骨髓間充質干細胞接種至分化培養基上，進行誘導分化；
所述分化培養基包括DMEM/F12培養基、胰島素18-22μg/mL、地塞米松5-10ng/mL、抗壞血酸40-50μg/mL、磺丁基-β-環糊精15-23μg/mL、甜菜堿45-52μg/mL、乙酸銦10-15ng/mL、谷胱甘肽50-60μg/mL。
2.根據權利要求1所述促進骨髓間充質干細胞成骨分化的方法，其特征在于，所述分化培養基包括DMEM/F12培養基、胰島素20μg/mL、地塞米松8ng/mL、抗壞血酸45μg/mL、磺丁基-β-環糊精20μg/mL、甜菜堿50μg/mL、乙酸銦12ng/mL、谷胱甘肽55μg/mL。
3.根據權利要求1所述促進骨髓間充質干細胞成骨分化的方法，其特征在于，所述步驟(1)中骨髓間充質干細胞接接種密度為1-2×104個/mL。
4.根據權利要求1所述促進骨髓間充質干細胞成骨分化的方法，其特征在于，所述步驟(2)中骨髓間充質干細胞的接種密度為2-4×105個/mL。
5.根據權利要求1所述促進骨髓間充質干細胞成骨分化的方法，其特征在于，所述步驟(2)中取傳代培養至第3-5代的骨髓間充質干細胞接種至分化培養基。
6.根據權利要求1所述促進骨髓間充質干細胞成骨分化的方法，其特征在于，所述傳代培養的比例為1:3-4。
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