[發(fā)明專利]一種高效制備核苷三磷酸生物合成方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011015996.5
• 申請(qǐng)日: 2020-09-24
• 公開（公告）號(hào): CN112143766A
• 公開（公告）日: 2020-12-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳勇;李靜簡(jiǎn);宋艷民
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津全和誠科技有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12P19/30
• 分類號(hào): C12P19/30
• 代理公司: 天津煜博知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 12246
• 代理人: 于碩

本發(fā)明提供一種高效制備核苷三磷酸生物合成方法，涉及核苷三磷酸合成領(lǐng)域。該高效制備核苷三磷酸生物合成方法，包括以下步驟：S1.以DNMP與磷酸根為原料，然后將其溶解于2?3倍的水溶液中之后得到混合物，向混合物中加入鹽酸溶液調(diào)節(jié)混合物的PH至4?5，得到基礎(chǔ)溶液；S2.向S1中得到的基礎(chǔ)溶液內(nèi)加入1.5?1倍營養(yǎng)物進(jìn)行供能,然后在對(duì)其加熱處理并均勻攪拌使其得到充分混合，之后得到混合物，然后將混合物放置容器中進(jìn)行存儲(chǔ)，留以后期備用。通過對(duì)合成方法的設(shè)計(jì)，使得該方法在進(jìn)行合成時(shí)具有操作簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)，并且在合成過程中所得物質(zhì)的純度高、生產(chǎn)成本低，進(jìn)而對(duì)生產(chǎn)具有促進(jìn)作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及核苷三磷酸合成技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種高效制備核苷三磷酸生物合成方法。

背景技術(shù)

核苷三磷酸(NTP)是一種含有三個(gè)磷酸基團(tuán)的核苷酸。自然界常見的型態(tài)包括腺苷三磷酸(ATP)、鳥苷三磷酸(GTP)、胞苷三磷酸(CTP)、胸腺苷三磷酸(TTP)以及尿苷三磷酸(UTP)等。這些分子中包含一個(gè)核糖，若是將核糖替換常去氧核糖，那么會(huì)使核甘三磷酸變成去氧核苷三磷酸，寫成dNTP，如去氧腺苷三磷酸(dATP)、去氧鳥苷三磷酸(dGTP)等。

核苷三磷酸在生物學(xué)中具有重要的意義，因此，現(xiàn)在對(duì)核苷三磷酸的需求時(shí)日益增加，但是，現(xiàn)在無論是從國外進(jìn)口亦或者是國內(nèi)的自主合成，其都存在著純度不高的問題，并且，以往對(duì)于核苷三磷酸的制備其存在著工藝復(fù)雜、成本高、合成困難的缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

(一)解決的技術(shù)問題

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種高效制備核苷三磷酸生物合成方法，解決了現(xiàn)在對(duì)于核苷三磷酸的合成存在著純度不高的問題，并且，以往對(duì)于核苷三磷酸的制備其存在著工藝復(fù)雜、成本高、合成困難的問題。

(二)技術(shù)方案

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：一種高效制備核苷三磷酸生物合成方法，包括以下步驟：

S1.以DNMP與磷酸根為原料，然后將其溶解于2-3倍的水溶液中之后得到混合物，向混合物中加入鹽酸溶液調(diào)節(jié)混合物的PH至4-5，得到基礎(chǔ)溶液；

S2.向S1中得到的基礎(chǔ)溶液內(nèi)加入1.5-1倍營養(yǎng)物進(jìn)行供能,然后在對(duì)其加熱處理并均勻攪拌使其得到充分混合，之后得到混合物，然后將混合物放置容器中進(jìn)行存儲(chǔ)，留以后期備用；

S3.對(duì)S2中得到的混合物中加入10％-15％金屬離子與1-2倍有機(jī)溶劑，并對(duì)其進(jìn)行混合攪拌，之后得到二次混合物；

S4.然后向S3中的二次混合按1:1加入具有通透性的酵母細(xì)胞與氫氧化鈉，調(diào)節(jié)PH至6-8，并在30-45℃的環(huán)境下進(jìn)行，使其產(chǎn)生化學(xué)效應(yīng)進(jìn)而制取得到核苷三磷酸溶液，之后對(duì)核苷三磷酸溶液進(jìn)行層析分離得到93％-98％的核苷三磷酸

優(yōu)選的，所述S1中鹽酸的濃度為1-1.5mol/L。

優(yōu)選的，所述S2中的營養(yǎng)物為蛋白胨1-2份、葡萄糖5-10份、蔗糖0.5-1份、維生素1-2份、牛肉膏3-4份，所述加熱處理溫度為40℃-55℃。

優(yōu)選的，所述S3中的金屬離子為鉀離子、鈉離子、鐵離子、鎂離子、鈣離子、磷離子、硫離子中的一種或多種混合物。

優(yōu)選的，所述S3中有機(jī)溶劑為山梨醇、甘露醇、木糖醇、三羥甲基乙烷、乙酸乙脂、甲苯、二甲苯、脂肪酶中的至少一種，所述有機(jī)溶劑的濃度為10-20ml/L。

優(yōu)選的，所述S4中通透性的酵母細(xì)胞為經(jīng)過化學(xué)方法或物理方法對(duì)酵母細(xì)胞膜改變的細(xì)胞。

優(yōu)選的，所述S4中的氫氧化鈉濃度為1-3mol/L。

(三)有益效果