[發明專利]MRS固體培養基、抑制金黃色葡萄球菌的微生物復合菌劑及其制備方法

在審

• 申請號: 202011014478.1
• 申請日: 2020-09-25
• 公開（公告）號: CN112625935A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 林大淇;朱廷恒
• 申請（專利權）人: 深圳合民生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01N63/20;A01P1/00;C12R1/125;C12R1/225
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及微生物技術領域，具體涉及一種MRS固體培養基、抑制金黃色葡萄球菌的微生物復合菌劑及其制備方法，所述MRS固體培養基，包括如下質量份的各組分：蛋白胨8g～12g、牛肉浸粉4g～7g、酵母浸粉2g～6g、葡萄糖17g～25g、吐溫800.5g～2g、磷酸氫二鉀1g～3g、乙酸鈉3g～7g、檸檬酸三銨1g～4g、硫酸鎂0.1g～0.9g、硫酸錳0.02g～0.1g、瓊脂11g～20g；而抑制金黃色葡萄球菌的微生物復合菌劑的制備方法采用了所述MRS固體培養基對菌種進行培養，并且制備得到的抑制金黃色葡萄球菌的微生物復合菌劑不僅抑菌效率高，對金黃色葡萄球菌的抑菌率大于等于99％，且生物安全性好，對環境友好，且不易產生耐藥性，無毒副作用以及生產成本低廉。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，特別是涉及一種MRS固體培養基、抑制金黃色葡萄球菌的微生物復合菌劑及其制備方法。

背景技術

金黃色葡萄球菌是一種兼性厭氧的革蘭氏陽性菌，最適宜生長溫度為37℃，pH為7.4，耐高鹽，可在鹽濃度接近10％的環境中生長，因此，該菌廣泛存在于自然環境中，空氣、污水等環境中也無處不在，成為一種常見的食源性致病微生物。金黃色葡萄球菌可分泌多種毒性蛋白質，是常見的引起醫院、社區感染的主要病原菌，其致病力較高，可造成嚴重感染，導致菌血癥、敗血癥等，甚至導致死亡。最近幾年的臨床研究報告指出，金黃色葡萄球菌已成為醫院內感染首位的革蘭氏陽性致病菌，其產物被認為是導致皮膚和軟組織嚴重感染的毒力因子。

為了防治金黃色葡萄球菌引起的疾病，可以從臨床上治療和環境中預防兩個方面減少該菌的危害。在臨床治療方面，主要是應用抗生素治療。但是，近年來隨著抗生素類藥物在臨床治療中用量、頻次及范圍的增加，金黃色葡萄球菌耐藥菌變異程度加重，且耐藥時間不斷縮短，原抗生素的治療效果大大降低，而該菌的耐藥種類增多、耐藥性亦增強，導致金黃色葡萄球菌耐藥菌株的感染率居高不下。鑒于金黃色葡萄球菌的生存分布環境廣泛，控制環境中的金黃色葡萄球菌的數量和存活是從源頭預防該菌感染的有效途徑。因此，環境消毒對減少此類病原微生物的感染非常重要。目前，環境中病原菌的消毒主要采用化學消毒劑進行，還有采用酶法抑菌、應用具有抑菌活性的抑菌微生物等對金黃色葡萄球菌進行抑制。

然而，常用的化學消毒劑例如季銨類化合物、酚類、醛類、氧化類、胍類消毒劑等已經歷數十年的發展，細菌逐漸產生對消毒劑的抵抗力，且這類化學試劑需要提取，制備工藝復雜、成本高，存在提取廢液、化學副產物等污染環境的風險，并不綠色環保；酶法抑菌生產工藝苛刻復雜和在應用中成本過高；而應用具有抑菌活性的微生物對金黃色葡萄球菌進行抑制，即“以菌治菌”，是一種經濟有效的辦法。抑菌微生物可以通過產生抗菌物質、有機酸、空間和營養競爭、形成抑菌生物膜等多種方式抑制金黃色葡萄球菌等病原菌的生存。不像抗生素的單一作用機制，抑菌微生物作用靶點多，作用機制多樣復雜，不易產生抗藥性。此外，抑菌微生物具有來源豐富、產生活性多樣的抑菌物質、易生產、周期短等優點。然而，現有的能夠抑制金黃色葡萄球菌的微生物或者復合菌劑的抑菌率較低，或者還要搭配其他的化學制劑或植物提取物使用，工藝復雜、制備成本較高以及環保性能較差。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術中的不足之處，提供一種MRS固體培養基、抑制金黃色葡萄球菌的微生物復合菌劑及其制備方法，該抑制金黃色葡萄球菌的微生物復合菌劑不僅抑菌效率高，生物安全性好，對環境友好，且不易產生耐藥性，無毒副作用以及生產成本低廉。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

一種MRS固體培養基，包括如下質量份的各組分：蛋白胨8g～12g、牛肉浸粉4g～7g、酵母浸粉2g～6g、葡萄糖17g～25g、吐溫800.5g～2g、磷酸氫二鉀1g～3g、乙酸鈉3g～7g、檸檬酸三銨1g～4g、硫酸鎂0.1g～0.9g、硫酸錳0.02g～0.1g、瓊脂11g～20g。

一種抑制金黃色葡萄球菌的微生物復合菌劑的制備方法，包括以下步驟：

制備LB液體培養基及LB固體培養基；