[發(fā)明專利]一種封閉劑及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011012133.2 | 申請日: | 2020-09-24 |
| 公開(公告)號: | CN112114128B | 公開(公告)日: | 2023-08-29 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 黃丹;來祥兵;趙愿安;舒芹 | 申請(專利權(quán))人: | 武漢生之源生物科技股份有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/53 | 分類號: | G01N33/53 |
| 代理公司: | 北京眾達德權(quán)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11570 | 代理人: | 江慧 |
| 地址: | 430000 湖北省武漢市東湖開發(fā)區(qū)高*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 封閉劑 及其 制備 方法 | ||
1.一種封閉劑在用于封閉固相載體上的空白位點或活化位點以減少標記物與固相載體的非特異性結(jié)合中的用途,所述封閉劑包括活化后的動物抗體和活化后的滅活標記蛋白的結(jié)合物,所述活化后的滅活標記蛋白為對標記蛋白進行滅活,后采用活化劑B進行活化獲得,所述標記蛋白包括堿性磷酸酶和辣根過氧化物酶中的一種,所述活化后的動物抗體和所述活化后的滅活標記蛋白的質(zhì)量比為1:(2.5~3.5),所述活化后的動物抗體采用活化劑A對動物抗體處理后獲得,所述動物抗體與所述活化劑A的質(zhì)量比為1:(3~10);所述活化劑A選自2-亞氨基硫烷鹽酸鹽、(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)二環(huán)己基碳二亞胺中的一種,所述滅活標記蛋白與所述活化劑B的質(zhì)量比為1:(0.8~1.5);所述活化劑B選自琥珀酰亞胺-4-(N-馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-1羥酸酯、戊二醛、過碘酸鈉中的一種,所述滅活采用的方式包括高溫滅活、強酸滅活或強堿滅活。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途,其特征在于,所述動物抗體為純度>95%的IgG或IgM抗體;所述動物抗體的來源包括鼠、兔、山羊、牛源中的一種。
3.一種權(quán)利要求1-2任一所述的封閉劑的制備方法,其特征在于,所述方法包括:
采用活化劑A對動物抗體處理,獲得活化后的動物抗體;
將標記蛋白滅活,獲得滅活標記蛋白,后采用活化劑B對所述滅活標記蛋白處理,獲得活化后的滅活標記蛋白,所述滅活采用的方式包括高溫滅活、強酸滅活或強堿滅活;
將所述活化后的動物抗體和所述活化后的滅活標記蛋白混勻,后純化,獲得所述封閉劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種封閉劑的制備方法,其特征在于,所述將所述活化后的動物抗體和所述活化后的滅活標記蛋白混勻時,加入二價金屬鹽溶液作為反應(yīng)催化劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種封閉劑的制備方法,其特征在于,所述二價金屬鹽溶液包括氯化鎂、氯化鈣、氯化銅、氯化鋅溶液中的一種;其中,所述氯化鎂溶液的濃度為0.8~1.5M。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種封閉劑的制備方法,其特征在于,所述純化采用分子篩進行處理。
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