[發(fā)明專利]由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法

有效

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• 申請日: 2020-09-16
• 公開（公告）號: CN111974985B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 田野;王利輝;解曉琳
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學
• 主分類號: B22F1/07
• 分類號: B22F1/07;B82B3/00
• 代理公司: 江蘇德善律師事務(wù)所 32488
• 代理人: 何紅梅

1.一種由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）將DNA折紙框架與納米粒子組成的復合結(jié)構(gòu)作為一個生長單元，或者以納米粒子直接作為一個生長單元；在微型磁珠上修飾上DNA，修飾DNA的反應(yīng)溫度為室溫，在旋轉(zhuǎn)器上進行，3-5小時反應(yīng)完畢，制得攜帶金球的DNA折紙復合物，納米粒子團簇組裝的生長單元；所述的DNA折紙框架為八面體DNA折紙框架，所述八面體DNA折紙框架的核苷酸序列如SEQ IDNO:1、2、3、4…120所示的核苷酸序列；

（2）設(shè)計生長單元，固定生長位點；再設(shè)計生長單元之間連接的DNA序列，由DNA序列互補，純化后的第一層生長單元與微型磁珠相連，以此固定生長位點；生長位點固定后通過磁鐵吸引磁珠，利用磁鐵用緩沖液洗滌，以此洗滌上清液后，再加入另外一層進行組裝，以逐步生長的方式完成組裝納米粒子團簇；引導組裝納米粒子團簇。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法，其特征在于：在步驟（1）中，所述的在DNA折紙框架內(nèi)嵌入納米粒子時，DNA折紙框架與納米粒子的摩爾濃度比為1：1.3；在步驟（2）中，所述的每一層生長單元與上一層生長單元反應(yīng)時間是12小時。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法，其特征在于：在步驟（2）中，所述的當生長單元組裝成目標產(chǎn)物時，加入的染料鏈與修飾微型磁珠的DNA比例為5：1。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法，其特征在于：在步驟（2）中，再將第一層生長單元與修飾過DNA的微型磁珠溶液混合，室溫下反應(yīng)8-12小時，反應(yīng)結(jié)束后，利用磁鐵用緩沖液清洗三次，去除未連接的生長單元，再加入第二層生長單元，在金屬混勻儀上恒溫反應(yīng)，反應(yīng)時間為10-12小時，轉(zhuǎn)速為1000 rpm，反應(yīng)結(jié)束。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法，其特征在于：在步驟（2）中，同樣利用磁鐵進行清洗，其次加入第三層生長單元，恒溫反應(yīng)時間為12小時，轉(zhuǎn)速為1000 rpm，反應(yīng)結(jié)束后清洗，最后加入染料DNA去除磁珠，制得由三個納米粒子組裝而成的三聚物。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法，其特征在于：在步驟（2）中，反應(yīng)結(jié)束后，同樣利用磁鐵進行清洗，其次加入第三層生長單元，恒溫反應(yīng)時間為12小時，轉(zhuǎn)速為1000 rpm，反應(yīng)結(jié)束后清洗，以同樣的方式加入第四層生長單元進行反應(yīng)，最后加入染料DNA去除磁珠，制得由四個納米粒子組裝而成的四聚物。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法，其特征在于：在步驟（2）中，所述的微型磁珠與修飾的DNA摩爾濃度比為1：5。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的由微型磁珠為生長模板及DNA框架為引導載體的納米粒子團簇組裝方法，其特征在于：在步驟（2）中，緩沖液為12.5 mM Mg²⁺。