[發(fā)明專(zhuān)利]一種茄子高效再生體系的建立方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010969831.5
• 申請(qǐng)日: 2020-09-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112042542A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-12-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張愛(ài)冬;尚靜;查丁石;吳雪霞;朱宗文
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 鄭州歐凱專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 41166
• 代理人: 王志興

本發(fā)明公開(kāi)了一種茄子高效再生體系的建立方法，包括如下步驟：S1材料與方法：S11試驗(yàn)材料的選擇：供試茄子材料為上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院設(shè)施園藝所選育的高代自交系1?1#、1?2#、4#和8#；S12種子滅菌與接種：將種子在水中浸泡5個(gè)小時(shí)充分吸收水分，隨后放入55℃的水浴鍋中浸種20分鐘，取出浸種后的種子，先用75％的酒精表明消毒30秒，在超凈工作臺(tái)中用無(wú)菌水清洗一次，隨后加入20％(v/v)的次氯酸鈉(NaClO)溶液，深層消毒20分鐘，用無(wú)菌水清洗3次，倒掉無(wú)菌水，將消毒好的種子倒在滅菌過(guò)的濾紙上。本發(fā)明能夠有效的分析茄子的再生體系受多種因素影響，包括不同基因型、外植體部位、激素濃度及配比的展示，能夠?qū)崿F(xiàn)茄子高效再生體系。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種茄子高效再生體系的建立方法。

背景技術(shù)

茄子(Solanum melongena L.)是茄科茄屬一年生草本植物，我國(guó)是世界上最大的茄子生產(chǎn)國(guó)，我國(guó)茄子具有產(chǎn)量高、適應(yīng)性強(qiáng)、供應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，為夏秋季節(jié)主要蔬菜之一。但茄子在栽培過(guò)程中經(jīng)常受到不良環(huán)境和病蟲(chóng)害的影響，嚴(yán)重降低茄子的產(chǎn)量及品質(zhì)。常用的農(nóng)業(yè)措施費(fèi)時(shí)費(fèi)力且效果有限，不能從根本上解決問(wèn)題。隨著分子生物學(xué)和生物技術(shù)的發(fā)展，利用生物技術(shù)手段培育具有抵抗不良環(huán)境、抗蟲(chóng)抗病的茄子新品種是未來(lái)發(fā)展的方向。

植物遺傳轉(zhuǎn)化，是將外源DNA分子(質(zhì)粒和染色體DNA)導(dǎo)入受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞基因組上，最終發(fā)育成導(dǎo)入基因在受體中穩(wěn)定遺傳表達(dá)的完整植株的過(guò)程。目前，轉(zhuǎn)基因技術(shù)在茄子中應(yīng)用進(jìn)展緩慢，其主要源于缺乏高效的茄子再生體系，因此探索高效的茄子再生體系對(duì)于茄子轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展至關(guān)重要。茄子的再生體系受多種因素影響，包括基因型、外植體部位、激素濃度及配比等。

發(fā)明內(nèi)容

基于背景技術(shù)存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提出了一種茄子高效再生體系的建立方法。

本發(fā)明提出的一種茄子高效再生體系的建立方法，包括如下步驟：

S1材料與方法：

S11試驗(yàn)材料的選擇：

供試茄子材料為上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院設(shè)施園藝所選育的高代自交系1-1#、1-2#、4#和8#；

S12種子滅菌與接種：

將種子在水中浸泡5個(gè)小時(shí)充分吸收水分，隨后放入55℃的水浴鍋中浸種20分鐘，取出浸種后的種子，先用75％的酒精表明消毒30秒，在超凈工作臺(tái)中用無(wú)菌水清洗一次，隨后加入20％(v/v)的次氯酸鈉(NaClO)溶液，深層消毒20分鐘，用無(wú)菌水清洗3次，倒掉無(wú)菌水，將消毒好的種子倒在滅菌過(guò)的濾紙上，將水吸干，將種子移入MS培養(yǎng)基上，先避光催芽，在種子露白后將其移至溫度25±1℃、光照周期16h/8h、光照強(qiáng)度2000-3000Lx的光照培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)；

S13誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選：

在生長(zhǎng)箱中長(zhǎng)至兩片子葉完全展開(kāi)時(shí)，在超凈工作臺(tái)上將其從組培瓶中取出，在滅菌后的濾紙上，將其子葉切成大約5mm×5mm的小塊，下胚軸切成約1cm的小段，并移至不同配方的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，子葉正面朝上，下胚軸橫向放置，于溫度25±1℃、光照周期16h/8h、光照強(qiáng)度2000-3000Lx的光照培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)，每?jī)芍芾^代一次，于四周后統(tǒng)計(jì)愈傷生長(zhǎng)情況；

S14再生分化培養(yǎng)基的篩選：

待四周誘導(dǎo)培養(yǎng)后，將長(zhǎng)出的愈傷組織移至不同的再生分化培養(yǎng)基，再生分化培養(yǎng)基在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上分別加入0.5mg/L、1mg/L和1.5mg/L的ZT，兩周繼代一次，于4-6周對(duì)生芽情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；

S15生根培養(yǎng)基的篩選：