[發(fā)明專(zhuān)利]對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物及其合成方法和在核酸熒光探針中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010966874.8
• 申請(qǐng)日: 2020-09-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112174885B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-10-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅竣仁;盧宇靖;鄭伯鑫;佘夢(mèng)婷;龍威;黃玄賀;陳翠翠;張藝瀚;鐘冬曉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣東工業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C07D215/38
• 分類(lèi)號(hào): C07D215/38;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 廣東廣信君達(dá)律師事務(wù)所 44329
• 代理人: 張燕玲

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物及其合成方法和在核酸熒光探針中的應(yīng)用。該衍生物具有如式1所示的化學(xué)結(jié)構(gòu)式，其中R為或本發(fā)明對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物具有較大的電子共軛體系平面，探針?lè)肿觾?nèi)的電荷轉(zhuǎn)移效應(yīng)可以影響分子的熒光發(fā)射強(qiáng)度，在體外試驗(yàn)中能夠特異性識(shí)別G?四鏈體DNA；本發(fā)明提供的熒光探針具有熒光強(qiáng)度高，結(jié)合常數(shù)強(qiáng)，檢測(cè)限低等優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物及其合成方法和在核酸熒光探針中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

核酸作為一種重要的生物大分子，在活細(xì)胞中承擔(dān)各種重要的生物功能，常見(jiàn)的核酸有RNA、雙鏈DNA等，除此之外，還有近年來(lái)引起廣泛研究的特殊核酸結(jié)構(gòu)G-四鏈體。RNA在活細(xì)胞中能夠編碼，轉(zhuǎn)錄和控制基因的表達(dá)，調(diào)節(jié)多種生命活動(dòng)。G-四鏈體DNA主要位于基因端粒、啟動(dòng)子等重要位點(diǎn)，承擔(dān)著生物開(kāi)關(guān)的重要作用。因此，開(kāi)發(fā)性能優(yōu)異的核酸熒光探針對(duì)核酸的形態(tài)和功能進(jìn)行研究有著十分重要的意義。

小分子探針是指針對(duì)某種特定目標(biāo)生物分子或生物離子的開(kāi)發(fā)的探測(cè)器，作為核酸熒光探針的重要一員，小分子探針能與特定的靶分子進(jìn)行特異性相互作用，并能被特殊的檢測(cè)技術(shù)所探知。與普通的檢測(cè)技術(shù)相比，探針技術(shù)具有靈敏度高、專(zhuān)一性強(qiáng)、快速準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，適用于分子影像和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。

目前，已有許多核酸的熒光探針被報(bào)道，現(xiàn)有的核酸熒光探針選擇性低、具有光致毒性大和光穩(wěn)定性差等缺點(diǎn)，這些缺陷影響其應(yīng)用價(jià)值。因此，開(kāi)發(fā)新型核酸熒光探針對(duì)核酸進(jìn)行研究和檢測(cè)具有重大意義。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的核酸探針選擇性低、毒性大和光穩(wěn)定性差的缺點(diǎn)和不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物。

本發(fā)明的又一目的在于提供一種上述對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物的合成方法。

本發(fā)明的再一目的在于提供一種上述對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物在核酸熒光探針中的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物，該衍生物具有如式1所示的化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

其中R為

上述對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物的合成方法，包括以下操作步驟：將1.5mmol4-氯-2-甲基喹啉和4.5mmol碘甲烷添加到密閉壓力反應(yīng)器中，然后用6mL環(huán)丁砜進(jìn)行溶解；將所得混合物在60℃下加熱并反應(yīng)12小時(shí)；反應(yīng)后，將混合物冷卻至室溫，然后添加15mL乙酸乙酯進(jìn)行沉淀，得到粗產(chǎn)物；粗產(chǎn)物在乙醇中重結(jié)晶得到純產(chǎn)物中間體a；將0.2mmol中間體a、0.6mmol胺類(lèi)化合物和0.4mmol 4-二甲基氨基苯甲醛添加到燒瓶中，用4mL正丁醇進(jìn)行溶解，攪拌并在80℃回流反應(yīng)8h；當(dāng)回流反應(yīng)完成時(shí)，將混合物冷卻至室溫，然后添加10mL乙酸乙酯，靜置30min后，抽濾得到對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物；所述胺類(lèi)化合物為嗎啡啉、吡咯烷、哌啶、丙胺、正定胺或丙胺醇。

上述合成方法的合成路線(xiàn)如下反應(yīng)式所示：

其中R為

上述的對(duì)二甲氨基苯乙烯喹啉衍生物在核酸熒光探針中的應(yīng)用。

優(yōu)選的，所述熒光探針應(yīng)用于檢測(cè)水溶液中的核酸。

優(yōu)選的，所述熒光探針應(yīng)用于檢測(cè)瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中的核酸。

優(yōu)選的，所述熒光探針應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞中的核酸。

優(yōu)選的，所述熒光探針應(yīng)用于在真核細(xì)胞中核酸顆粒染色以及核仁成像。

優(yōu)選的，所述核酸包括DNA或RNA。