[發明專利]基于共振能量轉移的電化學發光法檢測己烯雌酚的傳感器及其應用

有效

• 申請號: 202010932340.3
• 申請日: 2020-09-08
• 公開（公告）號: CN112114018B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 蘇暢;單學凌;陳智棟
• 申請（專利權）人: 常州大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/48;G01N21/76
• 代理公司: 常州市英諾創信專利代理事務所(普通合伙) 32258
• 代理人: 王志慧

本發明提供基于共振能量轉移的電化學發光法檢測己烯雌酚的傳感器及其制備方法和應用，包括作為能量共振轉移中供體Ag₃PO₄/Cu?MOF([Cu(L)(H₂O)₂]_n)、作為能量共振轉移中的受體的Ag NPs，Ag₃PO₄/Cu?MOF復合材料和Ag NPs之間通過兩條DNA鏈連接，其中一條連接受體，另一條為適配體用于連接供體和連接接受體的DNA鏈并共同修飾在玻碳電極上)；Ag₃PO₄/Cu?MOF復合材料是由Ag₃PO₄固定新型Cu?MOF而得。本發明的基于共振能量轉移的電化學發光傳感器具有較高檢測靈敏度，制備方法簡單，在檢測己烯雌酚的應用中，具有成本低、靈敏度高、特異性強的優點。

技術領域

本發明屬于電化學發光分析檢測技術領域，涉及一種基于共振能量轉移的電化學發光傳感器及其制備方法和應用，具體涉及一種將正磷酸銀(Ag₃PO₄)固定 Cu基MOFs([Cu(L)(H₂O)₂]_n)，然后將Ag₃PO₄/Cu-MOF作為基底材料,具有特異性識別作用的適配體(apt)為識別元素，共同修飾在玻碳電極(GCE)上，然后以 Ag-cDNA/apt/Ag₃PO₄/Cu-MOF/GCE為工作電極，定量檢測魚塘水中的己烯雌酚的電化學發光分析方法。

背景技術

隨著科學技術的快速發展和人們的物質需求日益增加，一系列的環境問題繼而爆發。環境內分泌干擾物(Endocrine Disrupting Chemicals，即EDCs)是一類存在于自然環境中的具有類激素效應的化學物質，對生物體內源激素的合成、分泌、轉運和降解過程具有干擾作用，進而損傷生物體的生殖發育、免疫、內分泌和神經系統，甚至導致其后代的內分泌代謝失調。

其中，己烯雌酚(DES)作為醫藥用品類的內分泌干擾物，它是一種人工合成的非甾體雌激素物質，能產生與天然雌二醇相同的所有藥理與治療作用，主要用于雌激素低下或缺乏癥及激素平衡紊亂引起的功能性出血、閉經，還可用于死胎引產前，以提高子宮肌層對催產素的敏感性，以及前列腺癌的故息療法。若母體孕期服用過己烯雌酚，女性胎兒發育至成年懷孕時易于流產，主要因為己烯雌酚致使子宮畸形；對于男性胎兒來說，由己烯雌酚引起的癥狀主要包括：隱睪、睪丸癌、附睪囊腫、不育等。己烯雌酚作為一種可以促進動物蛋白質合成的雌激素主要存在于豬羊魚肉等動物性食品中，在某些地區，己烯雌酚仍被非法用作促生長劑增加動物產量。然而，相對于天然雌激素，己烯雌酚在人體內更穩定更不容易被代謝出體外，殘留在動物體內的己烯雌酚將通過食物鏈進入人體，危害人類健康。因此，中華人民共和國農業部第235號公告在修訂的《動物性食品中獸藥最高殘留量》中規定所有食品動物和所有可食組織中己烯雌酚的最高含量為未檢出。近年來，已有較多研究提示，廣泛存在于自然水環境中的己烯雌酚除了對多種魚類的生長、發育和繁殖產生持久的慢性毒理效應之外，也對魚類脂質代謝過程造成影響，導致脂肪沉積異常，并影響養殖魚類的品質與食用安全性。所以建立一種快速、靈敏的己烯雌酚殘留檢測方法具有重要意義。

我國國家標準規定的DES檢測方法為液相色譜-串聯質譜法，目前用于DES 檢測的方法主要有酶聯免疫分析法、高效液相色譜法、液相色譜一質譜聯用法、電化學法、放射免疫法等。以上方法準確靈敏，但存在過程復雜、操作繁瑣以及攜帶不便等缺點，而電致化學發光(ECL)是由電化學反應引起的化學發光，因其靈敏度高、反應可控性強、儀器設備簡單等優點引起了廣泛的關注。共振能量轉移是一種新興的分子光譜分析方法，具體是指電子激發能在適當的能量供體和能量受體對之間的傳遞。而電致化學發光-共振能量轉移(ECL-RET)結合了兩者的優點，是一個很具有發展潛力的新領域。它既不需要激發光源，背景噪音較小，也避免了散射光的影響，已廣泛地應用于生物傳感器的構建。如何制備得到對己烯雌酚檢測靈敏度高的生物傳感器是本發明所要解決的技術問題。