[發明專利]一種生產鼠李糖脂的低溫特性菌株及其應用和生產方法

有效

• 申請號: 202010924375.2
• 申請日: 2020-09-04
• 公開（公告）號: CN112126598B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 汪江林;陳玲;李秦佩
• 申請（專利權）人: 上海恒什生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P19/44;C12R1/385
• 代理公司: 上海科律專利代理事務所(特殊普通合伙) 31290
• 代理人: 葉鳳

本發明涉及一種生產鼠李糖脂的低溫特性菌株及其應用和生產方法，屬于生物工程領域。采用Am607菌株進行鼠李糖脂的生產方法，除在23?42℃下進行培養和發酵生產外，其他都可以參照傳統銅綠假單胞菌發酵鼠李糖脂，包括以下步驟：a)菌種活化；培養1～2天；b)利用種子培養基制備種子液；在23?42℃培養，培養時間20～48h，測得種子液的OD600在5～6時，接種到裝有發酵培養基的發酵罐中；c)將所述種子液接種到發酵培養基中發酵，通過Am607銅綠假單胞菌株在23?42℃的發酵溫度發酵生產鼠李糖脂；發酵液中的底物濃度30?400g/L，調節pH至7.2。優選在25℃培養；優選發酵溫度24℃?28℃。

技術領域

本發明涉及一種生產鼠李糖脂的菌株及發酵生產方法，屬于生物工程領域。

背景技術

生物表面活性劑來源于微生物和動植物，由親水基(酸、陽離子、陰離子、單糖、雙糖或多糖)和疏水基(飽和、不飽和烴鏈或脂肪酸)構成。與化學合成表面活性劑相比較，生物表面活性劑化學結構更復雜，功能基團多，具有降低液體表面/界面張力、形成膠束以及兩相微乳液等多種表面活性功能，同時具有良好的熱穩定性和化學穩定性，且產品本身無毒，環境友好，可被環境微生物降解，具有較好的生物相容性，是典型的環保型＂綠色產品＂。此外，近年研究表明，生物表面活性劑可干擾細胞膜通透性，具有一定的抗菌、抗腫瘤、抗病毒等藥理作用和免疫功能，可被開發成新型生物醫藥和生物農藥，對于緩解農藥環境污染等問題具有突出作用。因此，環境問題日益嚴峻，人們越來越重視生物表面活性劑的開發和應用，以期代替常規的化學合成類表面活性劑，使之廣泛用于石油工業、生態環境、日化用品、食品和醫藥工業以及綠色農業等領域。

鼠李糖脂是目前為止研究最為深入的一種陰離子生物表面活性劑，能顯著降低水的表面張力改變固體表面的潤濕性，具有乳化、破乳、消泡、洗滌、分散與絮凝、抗靜電和潤滑等多種功能。自然界中可以合成鼠李糖脂的微生物很多，其中常用的微生物是假單胞菌類，尤其以銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)為主，可以利用多種碳源為底物合成鼠李糖脂，如葡萄糖、蔗糖、甘油、葵花籽油、菜籽油、大豆油等各種植物油。

公開號CN101177696B的中國專利公開了一種鼠李糖脂生物發酵液的工業化制備方法，突變菌株銅綠假單胞菌VTS-1以玉米油為碳源，發酵溫度控制在30～34℃。

公開號CN103589765B的中國專利公開了一種制備鼠李糖脂發酵液的方法，發酵溫度控制在35-39℃。

公開號CN108342431A的中國專利公開了一種鼠李糖脂的高效發酵工藝的方法，其種子培養和發酵時的溫度控制在30℃。

目前，現有利用銅綠假單胞菌，無論是以植物油還是用甘油、乙醇等以及其中的二種或兩種以上的混合物為碳源發酵產鼠李糖脂，其發酵溫度均在30-39℃，一般發酵溫度低于 30℃或高于39℃時菌體的產脂能力都會有大幅度的下降，甚至還會出現沒有產物生成的情況。

傳統銅綠假單胞菌其最適宜發酵溫度為30-37℃。

發明內容

本發明提供出了一種銅綠假單胞菌株，以解決目前銅綠假單孢菌株溫度適應范圍窄、無法實現低溫(25度)發酵的技術問題。

為此，本發明需要保護的技術方案為：

技術方案一

一種銅綠假單胞菌株，該菌株為銅綠假單胞菌Am607(Pseudomonas aeruginosaAm607)，保藏編號為CCTCC NO:M 2020269。

技術方案二

上述銅綠假單胞菌株的用途，用于生產鼠李糖脂。

技術方案三