[發(fā)明專利]一種對植物中降糖功能化合物的篩選及分離方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010865223.X
• 申請日: 2020-08-25
• 公開（公告）號: CN111812252B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王岱杰;施樹云;崔莉;呂翠;張宇;伊夫蒂哈爾·阿里;沙希德·阿齊茲;孫蓉;劉閏平
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省分析測試中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;A61K31/7034;A61P3/10;C07H15/203;C07H1/08
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

本發(fā)明涉及中藥有效成分的制備方法，具體提供一種對植物中降糖功能化合物的篩選及分離方法。所述對植物中降糖功能化合物的篩選方法包括對植物進(jìn)行萃取得到粗提物，將粗提物與葡萄糖苷酶孵育，酶與混合物通過超濾膜，去除未結(jié)合的成分，使酶失活，去除，對剩余組分進(jìn)行液相色譜分析，即得植物中具有降糖功能化合物。解決現(xiàn)有技術(shù)中對于化合物的分析方法通常先分離，再研究化合物的功能，造成極大浪費(fèi)的同時，大大降低了效率的問題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥有效成分的制備方法，具體提供一種對植物中降糖功能化合物的篩選及分離方法。

背景技術(shù)

這里的陳述僅提供與本公開有關(guān)的背景信息，而不必然構(gòu)成現(xiàn)有技術(shù)。

巖白菜(虎耳草科)是一種多年生草本植物，位于海拔2700-4700米的喜馬拉雅地區(qū)。在巴基斯坦吉爾吉特地區(qū)，該植物已被用作治療糖尿病的草藥。據(jù)報(bào)道，一種含有巖白菜的草藥可治療痤瘡、糖尿病、肥胖癥和病毒感染。此外，也有報(bào)道稱該植物可用于治療腎結(jié)石、傷口等，并且具有抗真菌作用、抗氧化劑、抗菌和免疫調(diào)節(jié)作用。巖白菜報(bào)道的主要化學(xué)成分包括巖白菜素或其衍生物萜烯、類黃酮等。

隨著老齡化社會到來，伴隨著人類肥胖和肥胖癥的發(fā)展，由此引發(fā)的糖尿病等代謝性疾病日漸加劇。根據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)告，目前世界上超過2億人患有II型糖尿病，因此預(yù)防糖尿病的治療已成為全球性的健康問題。α-葡萄糖苷酶抑制劑已被廣泛用于II型糖尿病患者的治療，其通過延遲吸收來自小腸的碳水化合物攝入，降低餐后血糖和胰島素水平。化學(xué)合成的α-葡萄糖苷酶抑制劑如阿卡波糖和伏格列波糖已被批準(zhǔn)用于臨床控制II型糖尿病，但長期服用會發(fā)生腹部不適、腸胃氣脹和腹瀉等不良副作用。因此，從天然產(chǎn)物中篩選和發(fā)現(xiàn)降血糖活性成分成為糖尿病新藥研發(fā)的重要方向，建立目標(biāo)植物中潛在降糖活性成分的特異性篩選、分離和藥理評價具有重要意義。

發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有技術(shù)中對于化合物的研究方法，通常是將化合物先分離，再對其進(jìn)行功能性檢測，然而，在分離的同時，常常會分離出不具備想要功能的化合物，再將多余化合物棄掉，造成了嚴(yán)重的浪費(fèi)，且對于操作人員來說，大大降低了效率。且現(xiàn)有技術(shù)中尚未發(fā)現(xiàn)巖白菜或其提取物在糖尿病的預(yù)防或治療中有聯(lián)系。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中對于化合物的分析方法通常先分離，再研究化合物的功能，造成極大浪費(fèi)的同時，大大降低了效率的問題。

本公開一個或一些實(shí)施方式中，提供一種對植物中降糖功能化合物的篩選方法，對植物進(jìn)行萃取得到粗提物，將粗提物與葡萄糖苷酶孵育，酶與混合物通過超濾膜，去除未結(jié)合的成分，使酶失活，去除，對剩余組分進(jìn)行液相色譜分析，即得植物中具有降糖功能化合物。

本公開一個或一些實(shí)施方式中，提供一種對降糖化合物分離的方法，針對上述任一項(xiàng)對植物中降糖功能化合物的篩選方法得到的降糖化合物，采用逆流色譜制備目標(biāo)成分峰，按照目標(biāo)峰收集相應(yīng)組分，減壓濃縮，得到樣品。

本公開一個或一些實(shí)施方式中，提供β-熊果苷在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用。

本公開一個或一些實(shí)施方式中，提供β-熊果苷在制備降糖藥物中的應(yīng)用。

本公開一個或一些實(shí)施方式中，提供6-O-沒食子酰熊果苷在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用。

本公開一個或一些實(shí)施方式中，提供6-O-沒食子酰熊果苷在制備降糖藥物中的應(yīng)用。

上述技術(shù)方案中的一個或一些技術(shù)方案具有如下優(yōu)點(diǎn)或有益效果：

1)本公開區(qū)分于現(xiàn)有技術(shù)中先對化合物分離，再進(jìn)行功能性研究的方法，提出了一種先對植物提取物中具備特定功能的化合物利用特定的底物酶結(jié)合，再將底物酶失活，將不能與底物酶結(jié)合的化合物篩除，剩余的化合物均為具備特定功能的化合物，只需將剩余具備特定功能的化合物分離，即得到所述功能的化合物，經(jīng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)與動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，利用該方法得到的化合物果然具備預(yù)期的效果，可見本公開所述的篩分及分離方法效果較好，具備實(shí)用性。