[發明專利]一種檢測新型冠狀病毒抗體的熒光免疫層析試紙

在審

• 申請號: 202010862067.1
• 申請日: 2020-08-25
• 公開（公告）號: CN111999507A
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 端青;江華;陳少隆;韓雪蓮;任宇豪;鄭玉玲
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/558
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 閆書寧

本發明公開了一種檢測新型冠狀病毒抗體的熒光免疫層析試紙。該試紙的結合墊上包被了時間分辨熒光微球標記的抗人IgM抗體；結合墊的制備方法如下：將時間分辨熒光微球和抗人IgM抗體混合，加入含0.1?0.5％BSA的硼酸緩沖液封閉；離心，收集沉淀；用含0.1?0.5％BSA的硼酸緩沖液重懸沉淀，得到標記溶液；將標記溶液噴涂在膜上，干燥，得到結合墊；硼酸緩沖液為pH7.0?8.5、10?100mM硼酸緩沖液。實驗證明，使用本發明所提供的熒光免疫層析試紙可以檢測樣品中是否含有新型冠狀病毒抗體，操作簡單，耗時短，準確率高，特異性好且靈敏度高。本發明所提供的熒光免疫層析試紙在現場快速檢測新型冠狀病毒抗體中具有重要的應用價值。

技術領域

本發明屬于生物技術與領域，具體涉及一種檢測新型冠狀病毒抗體的熒光免疫層析試紙。

背景技術

冠狀病毒是一類有包膜的單股正鏈RNA病毒，因電鏡下病毒顆粒形似皇冠而得名。冠狀病毒的宿主范圍主要包括鳥類和哺乳類，迄今為止，已鑒定出七種可感染人類的 冠狀病毒，其中SARS病毒(SARS-CoV)、中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)和新 型冠狀病毒(SARS-CoV-2)的出現給世界經濟衛生造成了極大威脅。新型冠狀病毒屬 于冠狀病毒科、冠狀病毒屬病毒，感染人后可引起不同程度的癥狀，以發熱、乏力、 干咳為主要表現，嚴重者出現肺炎、急性呼吸窘迫綜合征甚至死亡。新型冠狀病毒的 主要傳播方式是飛沫傳播和接觸傳播。

關于新型冠狀病毒的檢測，最初通過檢測樣本中是否含有病毒核酸實現的，但因樣本采集、試劑、操作等原因導致陽性率降低。將疑似病例具有肺炎影像學特征者作 為臨床診斷病例標準。但不同的肺炎類型可能會出現相似的組織學病理變化，且CT 檢測存在交叉感染的風險。

發明內容

本發明的目的是檢測新型冠狀病毒。

本發明首先保護一種檢測新型冠狀病毒抗體的熒光免疫層析試紙，其結合墊上包被了時間分辨熒光微球標記的抗人IgM抗體；

所述結合墊的制備方法可如下：

(1)將時間分辨熒光微球和抗人IgM抗體混合，加入含0.1-0.5％(如0.1-0.3％、0.3-0.5％、0.1％、0.3％或0.5％)BSA的硼酸緩沖液封閉；

(2)完成步驟(1)后，離心，收集沉淀；

(3)完成步驟(2)后，用含0.1-0.5％(如0.1-0.3％、0.3-0.5％、0.1％、0.3％ 或0.5％)BSA的硼酸緩沖液重懸沉淀，得到標記溶液；

(4)將標記溶液噴涂在膜上，干燥，得到包被了時間分辨熒光微球標記的抗人 IgM抗體的結合墊；

所述硼酸緩沖液為pH7.0-8.5(如pH7.0-7.5、pH7.5-8.0、pH8.0-8.5、pH7.0、pH7.5、pH8.0或pH8.5)、10-100mM(如10-25mM、25-50mM、50-100mM、10mM、25mM、 50mM或100mM)硼酸緩沖液。

上述熒光免疫層析試紙中，所述將標記溶液噴涂在膜上可為將標記溶液噴涂在玻璃纖維素膜上。

上述熒光免疫層析試紙中，所述硼酸緩沖液具體可為pH8.0、25mM硼酸緩沖液。

上述熒光免疫層析試紙中，所述時間分辨熒光微球可為含銪時間分辨熒光微球。

上述熒光免疫層析試紙中，反應膜上的質控線位置可包被所述抗人IgM抗體的抗體。檢測線位置可包被新型冠狀病毒抗原。

上述任一所述新型冠狀病毒抗原可為新型冠狀病毒NP抗原。

上述任一所述抗人IgM抗體可為羊抗人IgM抗體、鼠抗人IgM抗體或兔抗人IgM 抗體。