[發明專利]一種地衣芽孢桿菌宿主細胞及其遺傳改造方法與應用

有效

• 申請號: 202010858709.0
• 申請日: 2020-08-24
• 公開（公告）號: CN112239743B
• 公開（公告）日: 2023-01-13
• 發明（設計）人: 路福平;孫宴清;周翠霞;張會圖;李玉;劉逸寒
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/75;C12N15/56;C12N15/54;C12N15/52;C12N9/56;C12R1/10
• 代理公司: 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙) 11617
• 代理人: 栗華楠

1.一種地衣芽孢桿菌宿主菌，其特征在于，所述宿主菌是在地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）2709的基礎上，通過敲除eps、pgs、sigF、chiAB、pulA、amyA、lchAC、upp基因來構建的；

所述eps基因位于 GenBank CP033218中的地衣芽孢桿菌2709即TCCC11148全基因組序列上第1967676-1983603位;

所述pgs基因位于 GenBank CP033218中的地衣芽孢桿菌2709即TCCC11148全基因組序列上第1805920-1808919位;

所述sigF基因位于全基因組序列上第3898937-3899704位；

所述chiAB基因位于全基因組序列上第909808-913767位；

所述pulA基因位于全基因組序列上第2420607-2422739位；

所述amyA基因位于全基因組序列上第582978-584516位；

所述lchAC基因位于全基因組序列上第834378-849050位；

所述upp基因位于全基因組序列上第1714807-1715436位；

所述全基因組序列的GenBank編號為 CP033218。

2.如權利要求1所述一種地衣芽孢桿菌宿主菌，其特征在于，chiAB、pgs、lchAC、eps基因的敲除是通過構建含有敲除基因上、下游同源臂的敲除載體實現的。

3.如權利要求1所述一種地衣芽孢桿菌宿主菌，其特征在于，sigF、pulA、amyA基因的敲除是通過CRISPR/Cas9基因編輯方法實現的。

4.權利要求1所述地衣芽孢桿菌宿主菌的應用。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，用于堿性蛋白酶AprE的表達。