[發明專利]一種撕裂蠟孔菌孢子液的制備方法

在審

• 申請號: 202010822554.5
• 申請日: 2020-08-14
• 公開（公告）號: CN111925947A
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 四川金珠生態農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;C12R1/645
• 代理公司: 成都頂峰專利事務所(普通合伙) 51224
• 代理人: 王偉

本發明涉及農業微生物技術領域，公開了一種撕裂蠟孔菌孢子液的制備方法，通過斜面種子培養、搖瓶種子培養、種子罐培養、發酵罐培養、發酵液預處理、密閉封存后得到撕裂蠟孔菌孢子液。通過斜面種子培養，得到豐茂的氣生菌絲；通過搖瓶種子培養得到舒展、細長，無成團結塊現象的菌絲；通過種子罐培養提升菌體的濃度；再通過發酵罐培養繼續提升菌絲體的濃度；待發酵完成時，對發酵液進行預處理，以促進被囊孢子的釋放，得預處理發酵液，再對預處理發酵液進行分裝密封存放后得到撕裂蠟孔菌孢子液，方便存儲，更有利于田間噴灑使用；并且培養菌絲過程中，外觀無結塊、減少結球或呈結成絲狀的現象，產品質量高。

技術領域

本發明屬于農業微生物技術領域，特別涉及一種撕裂蠟孔菌孢子液的制備 方法。

背景技術

我國化肥農藥的使用量位居世界各國之首，高量的化肥農藥投入帶來了一 系列環境、生態及食品安全問題。在現代集約化農業生產中，需要大量頻繁施 用農藥防治作物病害。但長期、大量施用農藥造成了一系列生產、環境和健康 問題，如病菌耐藥性增強，藥效降低，用藥量增大，環境和農產品的農藥殘留 量增加，影響食品安全，危害人類健康等。

真菌病害占作物病害的70％～80％。目前，病害防治的主要手段是選育高 抗品種，加強田間管理和施用化學農藥為主。但是，具有育種周期較長，費用 高昂；田間管理需要生產者較高的操作水平，消耗大量勞力的缺陷；而大量施 用化學農藥產生上述一系列生產、環境和健康問題。因此，研制安全、無毒、 高效的生物農藥十分必要。

生防菌主要通過分泌抗菌物質，與病原菌競爭營養空間，殺滅或抑制病原 微生物，或誘導植物獲得抗性，提高植物自身免疫力，達到少施或不施農藥； 促生菌能分泌促生物質如生長素類，促進植物生長，活化土壤難溶性養分，如 溶磷、解鉀，提高養分有效性，達到減施化肥之目的。故篩選高效生防菌、促 生菌或兼具兩種功能的微生物菌株并建立相應配套的生產技術是一項亟待創新 的工作，也是目前農業科研與應用的熱點之一。

近年來，人們發現的生防菌主要為細菌，真菌相對較少。在已發現的生防 菌中，具有抗菌譜廣、高效、適應性強的菌株不多，亟待篩選出更多的廣譜、 高效、適應性強的菌株，應用于農業生產。目前，人們所發現的生防真菌主要 包括木霉菌屬、毛殼菌屬、菌根真菌屬和腐霉屬，它們通過分泌抗菌物質，產 生溶菌和重寄生作用，誘導植物產生抗性等多種途徑拮抗病菌。

撕裂蠟孔菌是一種廣譜微生物殺菌劑，是植物致病真菌的天敵，其活性成 分主要是撕裂蠟孔菌被囊孢子；其屬于卵菌綱、霜霉目、腐霉科、腐霉屬，暫 發現有120多個小種。作用特點在于其系列分泌物不但對多種致病真菌具有很 強的寄生及抗生作用，而且可以促進植物生長，使植株茁壯；同時卵孢子狀態 穩定性好、更易耐受逆境。但是現有的撕裂蠟孔菌不易存儲，不方便田間噴灑 使用，而且現有技術在培養菌絲過程中，容易結塊、結球或呈結成索狀，從而 影響菌絲體的總產量，最終導致孢子數達不到標準，嚴重影響產品質量。

發明內容

為解決上述問題，本發明的目的在于提供一種撕裂蠟孔菌孢子液的制備方 法，所制得的撕裂蠟孔菌孢子液方便存儲，能夠減少貯藏運輸成本，更有利于 田間噴灑使用；并且培養菌絲過程中，外觀無結塊、結球或呈結成索狀的現象， 產品質量高。

為實現上述目的，本發明的技術方案如下：

一種撕裂蠟孔菌孢子液的制備方法，具體包括：

菌種選擇，選用撕裂蠟孔菌(Ceriporia lacerata)菌株，于2015年4月28 日被保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝 陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏編號為 CGMCCNo.10485；

斜面種子培養，在無菌條件下將所述菌株涂布接種于斜面培養基上，得斜 面菌絲；