[發明專利]一種家蠶血液型膿病的智能檢測系統及方法

在審

• 申請號: 202010813793.4
• 申請日: 2020-08-13
• 公開（公告）號: CN111999317A
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 孫運朋;任曉曉;楊萬軍;卿卓;羅朝斌
• 申請（專利權）人: 貴州省蠶業研究所(貴州省辣椒研究所)
• 主分類號: G01N23/00
• 分類號: G01N23/00;G01N1/28
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 趙紅霞

本發明屬于家蠶疾病檢測技術領域，公開了一種家蠶血液型膿病的智能檢測系統及方法，所述室內多品種家蠶血液型膿病的智能試驗系統包括檢測樣品制備模塊、檢測樣品儲存模塊、圖像采集模塊、光源控制模塊、顯示模塊、中央處理模塊、信號傳輸模塊、云服務器、圖像處理模塊、數據判斷輸出模塊、數據儲存模塊和語音提示模塊。本發明通過對檢測樣品進行圖像采集，并將采集圖像與通過試驗獲取的結果進行對比識別，能夠提高家蠶血液型膿病試驗檢測結果的準確度，避免外界因素的干擾；同時本發明在多品種家蠶血液型膿病試驗檢測過程中，能夠進行語音輔助操作，使操作試驗者更加準確完成操作，并且提高整體裝置的智能性。

技術領域

本發明屬于家蠶疾病檢測技術領域，尤其涉及一種家蠶血液型膿病的智能檢測系統及方法。

背景技術

目前，養蠶后特別是發生過膿病的蠶室、蠶具等,如不經消毒重復使用,則容易導致傳染而發病。養蠶室、簇室、貯桑室等,如消毒不徹底,都能成為病毒傳染來源。不潔水源若來源于洗過蠶具的塘水,未經消毒即用作蠶室和貯桑室用水,同樣可以成為傳染源。病毒傳染的主要途徑有食下傳染和創傷傳染2種。病蠶流出的濃汁或病蠶尸體,發現尚未流出濃汁的病蠶,如立即拾除,可消滅再傳染的機會；病蠶排出的蠶糞中帶有大量病毒,會污染蠶座內的桑葉,造成蠶座內的傳染,使病毒迅速蔓延。病毒經食下或創傷侵入蠶體后,能否引起發病及發病率高低與蠶體本身的許多因素及環境條件有密切關系。蠶體對疾病的抵抗能力一方面取決于自身遺傳基因,另一方面也受到生長發育過程中周邊環境的影響。為了檢測血液型膿病，家蠶血液型膿病的智能檢測系統發揮著關鍵性的作用。但是現有技術中室內多品種家蠶血液型膿病的智能試驗過程中，易受到外部因素的影響，降低檢測的結果。同時現有技術中室內多品種家蠶血液型膿病的智能試驗過程中，只能依靠試驗者的記憶進行試驗操作，易錯誤操作。

通過上述分析，現有技術存在的問題及缺陷為：

(1)現有技術中室內多品種家蠶血液型膿病的智能檢測過程中，易受到外部因素的影響，降低檢測的結果。

(2)現有技術中室內多品種家蠶血液型膿病的智能檢測過程中，只能依靠試驗者的記憶進行試驗操作，易錯誤操作。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供了一種家蠶血液型膿病的智能檢測系統及方法。

本發明是這樣實現的，一種家蠶血液型膿病的智能檢測方法，所述家蠶血液型膿病的智能檢測方法包括：

步驟一，剪去蠶的尾角或腹足，制作血液樣本，對蠶的尾角或腹足進行研磨，滴入相應的溶液，再進行精細研磨檢測樣品；

步驟二，將制作完成的檢測樣品放置在專門的溫度調節保溫箱內部，分成3份，一份作為檢測樣品，另兩份作為備用樣品；

步驟三，利用電子顯微鏡獲取檢測樣品的樣品圖像，并對所獲取的檢測樣品圖像進行處理；

步驟四，將一份備用樣品加入少量磷酸緩沖液過濾，濾液使用差速離心法反復離心至乳白色，收集沉淀，用少量的PBS懸浮靜置；

步驟五，溶于適量TE(pH 8.0)中，加入等體積堿解液(pH 10.8)，37℃堿解4h；10％HAc調pH值至7～8；加SDS和蛋白酶K至終濃度分別為0.5％100μg/mL，37℃水浴3h；

步驟六，加1/10體積的3mol/L醋酸鈉溶液；加3倍體的冰乙醇沉淀DNA，漂洗、風干后的基因組DNA溶于TE，貯存備用；

步驟七，在不同濃度的反應組分和不同反應時間條件下，在實時濁度儀中進行LAMP反應，每隔6s測定1次濁度值，根據濁度值繪制濁度變化曲線，當濁度值大于0.25即可判為陽性；

步驟八，根據家蠶血液型膿病試驗獲取的圖像樣本對檢測樣品圖像進行識別，對檢測輸出的樣品結果進行輸出，若檢測血液樣本出現六角形，大小均勻，折光性較強，則判定為家蠶血液型膿病；