[發明專利]一種使用大孔吸附樹脂分離發酵液中紅景天苷的方法在審
| 申請號: | 202010783347.3 | 申請日: | 2020-08-06 |
| 公開(公告)號: | CN111995644A | 公開(公告)日: | 2020-11-27 |
| 發明(設計)人: | 趙廣榮;孫曉翠 | 申請(專利權)人: | 天津大學 |
| 主分類號: | C07H1/06 | 分類號: | C07H1/06;C07H15/18 |
| 代理公司: | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人: | 琪琛 |
| 地址: | 300350 天津市津南區海*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 使用 吸附 樹脂 分離 發酵 紅景天 方法 | ||
本發明公開了一種使用大孔吸附樹脂分離發酵液中紅景天苷的方法,將產紅景天苷的大腸桿菌發酵制得發酵液,離心,得到上清液。將上清液加入無水乙醇,沉淀,過濾,將上清液旋蒸除去乙醇,得到濃縮液;將濃縮液與水飽和正丁醇萃取,將水飽和正丁醇層混合蒸干,制得紅景天苷粗品;將紅景天苷粗品溶解后,使用達到紅景天苷吸附平衡的大孔樹脂柱進行脫色,脫色后的溶液作為上樣液,備用;調節上樣液的pH,將上樣液流過大孔樹脂柱;將乙醇水溶液作為洗脫液,通過大孔樹脂柱進行洗脫,收集洗脫液;將洗脫液濃縮,凍干,得到紅景天苷。本發明方法具有收率較高、操作簡單以及環境友好等優點,為紅景天苷的大規模生產提供技術支持。
技術領域
本發明涉及發酵產物的分離純化,特別涉及一種使用大孔吸附樹脂分離發酵液中的紅景天苷的方法。
技術背景
紅景天苷(Salidroside)是一種天然存在于植物中的酚苷類化合物,來源于紅景天屬植物的根莖中,是由對羥基苯乙醇在醇羥基位置糖基化所形成。紅景天苷的結晶是無色透明的針狀晶體,其極易溶于水,并且易溶于甲醇和乙醇,但是難溶于乙醚。在酸性條件下,紅景天苷可分解為1分子葡萄糖和1分子對羥基苯乙醇。紅景天苷具有抗氧化、抗輻射、抗疲勞、免疫調節等多種藥理活性,在化妝品、食品、保健品、藥品等工業生產中被廣泛使用。
紅景天苷主要是從植物紅景天中提取,但存在含量較低,且生長周期較長的弊端。已報道了用微生物合成紅景天苷,但從發酵液中分離紅景天苷的方法尚未報道。
發明內容
本發明的目的是提供一種使用大孔吸附樹脂分離發酵液中紅景天苷的方法,解決現有技術中紅景天苷產量低的問題。
本發明的技術方案概述如下:
一種使用大孔吸附樹脂分離發酵液中紅景天苷的方法,包括以下步驟:
(1)將產紅景天苷的大腸桿菌發酵制得發酵液,離心,得到上清液。
(2)將上清液加入無水乙醇,在4℃的條件下沉淀12h后,過濾,將上清液旋蒸除去乙醇,得到濃縮液。
(3)將濃縮液與水飽和正丁醇按照1:1的比例萃取,萃取3-5次后,將水飽和正丁醇層混合蒸干,制得紅景天苷粗品。
(4)將紅景天苷粗品溶解后,使用達到紅景天苷吸附平衡的大孔樹脂柱進行脫色,脫色后的溶液作為上樣液,備用。
(5)調節上樣液的pH,以2BV/h的流速將上樣液流過大孔樹脂柱。
(6)將乙醇水溶液作為洗脫液,以2BV/h的流速通過大孔樹脂柱進行洗脫,收集洗脫液。
(7)將洗脫液濃縮,凍干,得到紅景天苷。
步驟(2)中加入無水乙醇混勻后,乙醇濃度為75%-85%。
步驟(4)中紅景天苷粗品溶解后,配置的溶液中紅景天苷濃度為6.0g/L,大孔吸附樹脂的型號優選為LX-12。
步驟(5)中上樣液的pH為6-8,大孔吸附樹脂的型號優選為LX-18、LX-68和SP825。
步驟(6)中洗脫液乙醇水溶液的濃度分別50%,70%和80%。
有益效果:
本發明的一種發酵液中分離紅景天苷的方法,具有收率較高、操作簡單以及環境友好等優點,為紅景天苷的大規模生產提供技術支持。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明作進一步地詳細說明,但本發明的實施方式不限于此。
實施例1:
一種使用大孔吸附樹脂分離發酵液中紅景天苷的方法,包括以下步驟:
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