[發明專利]一種中藥單體聯合抗生素藥敏檢測方法

在審

• 申請號: 202010775806.3
• 申請日: 2020-08-05
• 公開（公告）號: CN112011588A
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 瞿玲娜;邢海洋
• 申請（專利權）人: 瞿玲娜
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616
• 代理人: 陳月婷

1.一種中藥單體聯合抗生素藥敏檢測方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

1)先將中藥單體溶解于二甲基亞砜，配制成濃度為100mg/ml的中藥單體溶液；

2)取42gM-H瓊脂干粉溶解于1000ml蒸餾水中，燒開三次，配制成為M-H瓊脂液體，相同液體配置三份，待M-H瓊脂液體冷卻至50～60℃，向瓊脂液體中加入步驟1)配制好的中藥單體溶液，并顛倒搖勻，得混有中藥單體的M-H瓊脂液體；

3)將以上混有中藥單體藥液的M-H瓊脂液體傾倒入直徑為90mm無菌培養皿中，厚度為4mm，冷卻得含藥物平板待用；

4)待步驟3)含藥物平板冷卻后，按照傳統K-B法，在平板表面均勻涂布0.5MCF的待測細菌菌液，于室溫中放置3-5分鐘等待干燥，然后將抗生素紙片貼于涂布待測細菌菌液后的含藥物平板上，保持各抗生素紙片的中心距≥24mm，紙片與平板內緣距離≥15mm，倒置于35℃的溫箱中，于16-18小時后觀察結果；

5)結果判定：在黑色無反光的背景下測量包括紙片直徑在內的抑菌圈直徑，抑菌圈的邊緣以肉眼看不見細菌生長為準。

2.根據權利要求1所述的一種中藥單體聯合抗生素藥敏檢測方法，其特征在于：所述步驟2)中M-H瓊脂液體冷卻溫度為50～60℃，向其內加入10ml步驟1)配制好的中藥單體溶液，并顛倒搖勻，得含中藥單體濃度為1mg/ml的M-H瓊脂液體。

3.根據權利要求1所述的一種中藥單體聯合抗生素藥敏檢測方法，其特征在于：所述步驟2)中M-H瓊脂液體冷卻溫度為50～60℃，向其內加入5ml步驟1)配制好的中藥單體溶液，并顛倒搖勻，得含中藥單體濃度為0.5mg/ml的M-H瓊脂液體。

4.根據權利要求1所述的一種中藥單體聯合抗生素藥敏檢測方法，其特征在于：所述步驟2)中M-H瓊脂液體冷卻溫度為50～60℃，向其內加入2.5ml步驟1)配制好的中藥單體溶液，并顛倒搖勻，得含中藥單體濃度為0.25mg/ml的M-H瓊脂液體。