[發明專利]核酸擴增用試劑的凍干保護組方、制品及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010764532.8
• 申請日: 2020-07-31
• 公開（公告）號: CN114058684A
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 林鈺瓊;章瑞程;范國來;葉甜甜;黃紅丹;蕭瀚銘;張俊杰
• 申請（專利權）人: 廣東菲鵬生物有限公司
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686;C12Q1/70;C12R1/93
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 徐樂

本發明涉及生物技術領域，具體而言，提供了一種核酸擴增用試劑的凍干保護組方、制品及其制備方法和應用。該凍干保護組方包括甘露醇、葡聚糖、PVP和吐溫。該凍干保護組方延長了核酸擴增用試劑的保質期，解決了核酸擴增用試劑長途運輸和長期保存困難的問題，能夠實現常溫運輸。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體而言，涉及一種核酸擴增用試劑的凍干保護組方、制品及其制備方法和應用。

背景技術

核酸擴增是通過酶的作用將待檢測核酸序列進行擴增，然后檢出的方法，其是一類技術方法的總稱，包括常規PCR、實時熒光PCR、等溫核酸擴增技術等等。

實時熒光定量PCR技術(Real-time PCR)于1996年由美國Applied Biosystems公司提出，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號的積累實時監測整個PCR反應的進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的過程，而且與常規PCR相比，它具有特異性強、有效解決PCR防污染的問題、自動化程度高等特點，目前已廣泛應用。

目前的PCR擴增試劑基本呈液體狀態，在常溫下保存并不穩定，室溫1個月即失效，在2～8℃保存，有效期也只有3個月左右。而且液體試劑每次使用都需要反復凍融，對試劑的活性有很大的影響，這很大程度上限制了核酸擴增用試劑的長期使用和長途運輸，增加了運輸的成本及復雜性，并且容易因保存溫度不當而引起其敏感性降低甚至完全失效。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種核酸擴增用試劑的凍干保護組方。

本發明的第二目的在于提供一種凍干核酸擴增用試劑的制備方法。

本發明的第三目的在于提供一種凍干核酸擴增用試劑。

本發明的第四目的在于提供凍干核酸擴增用試劑的應用。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種核酸擴增用試劑的凍干保護組方，所述凍干保護組方包括甘露醇、葡聚糖、PVP和吐溫。

進一步地，甘露醇、葡聚糖、PVP和吐溫的含量分別獨立地為：2-15w/v％、0.5-5w/v％、0.1-2w/v％和0.01-0.5v/v％。

進一步地，甘露醇、葡聚糖、PVP和吐溫的含量分別獨立地為：7-15w/v％、2-5w/v％、0.1-1w/v％和0.1-0.5v/v％。

進一步地，甘露醇、葡聚糖、PVP和吐溫的含量分別獨立地為：8-13w/v％、2.5-4w/v％、0.1-0.5w/v％和0.1-0.3v/v％。

進一步地，所述凍干保護組方還包括海藻糖，含量優選為3-20w/v％，進一步優選為5-20w/v％。

進一步地，所述凍干保護組方還包括BSA，含量優選為0.05-1w/v％，進一步優選為0.1-1w/v％。

進一步地，吐溫包括吐溫80或吐溫20。

進一步地，核酸擴增包括新型冠狀病毒核酸檢測或艾滋病毒核酸檢測。

一種凍干核酸擴增用試劑的制備方法，將核酸擴增用試劑和上述凍干保護組方的混勻液冷凍干燥，得到凍干核酸擴增用試劑。

進一步地，核酸擴增用試劑包括酶。

進一步地，核酸擴增用試劑包括逆轉錄酶或DNA聚合酶。

進一步地，核酸擴增用試劑還包括RNA酶抑制劑、dNTPS、引物、探針或鹽離子。

進一步地，逆轉錄酶的濃度為2-30U/μL。