[發明專利]利用醉蝶花揮發性成分提取物抑制黃瓜枯萎病菌活性方法

在審

• 申請號: 202010736041.2
• 申請日: 2018-01-18
• 公開（公告）號: CN111838194A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 張艷菊;楊森;楊靜
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: A01N65/08
• 分類號: A01N65/08;A01N49/00;A01N35/04;A01N43/12;A01N25/18;A01P3/00
• 代理公司: 昆明合眾智信知識產權事務所 53113
• 代理人: 劉靜怡

1.利用醉蝶花揮發性成分提取物抑制黃瓜枯萎病菌活性方法，其特征在于，包括以下步驟：采用水蒸氣蒸餾法提取醉蝶花莖葉，獲得醉蝶花揮發成分提取物，將醉蝶花揮發成分對黃瓜枯萎病菌進行生物熏蒸。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，采用水蒸氣蒸餾法提取醉蝶花莖葉包括以下步驟：將醉蝶花莖葉粉碎，加蒸餾水，混勻，加氯化鈉；將揮發油提取器與回流冷凝管連接，從冷凝管上端加入蒸餾水使充滿揮發油測定器的刻度部分，并溢流入燒瓶為止；加熱至沸，并保持連續沸騰，至測定器中的油面不再變化；放置；開啟活塞，使油面下降與0刻度平齊，收集揮發油并用色譜純乙酸乙酯稀釋。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，還包括GC/MS分析步驟。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，GC的條件包括：采用BD-5MS彈性石英毛細管柱；進樣口溫度為250℃、ECD檢測器溫度為250℃；載氣為高純氦氣，純度99.999％，流速1mL/min；柱溫起始為45℃，保持5min，以4℃/min升至210℃，保持3min，再以15℃/min升至230℃，不分流進樣，進樣量1μL。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，MS的條件包括：離子源EI，離子源溫度230℃，電子能量60eV，發射電流35.0μA，四極桿溫度165℃，轉接口溫度275℃，電子倍增器電壓350V，質量掃描范圍為45-500amu；利用N IST 05標準質譜庫分析試驗獲得的成分。

6.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其特征在于，所述醉蝶花揮發成分提取物包括牡丹酚、芳樟醇和茶香螺烷一種或幾種的混合。

7.醉蝶花和/或醉蝶花揮發成分提取物在抑制黃瓜枯萎病菌的活性中的應用，其特征在于，所述醉蝶花揮發成分提取物通過以下方法制備：采用水蒸氣蒸餾法提取醉蝶花莖葉，獲得醉蝶花揮發成分提取物，將醉蝶花揮發成分對黃瓜枯萎病菌進行生物熏蒸；和/或將醉蝶花莖葉粉碎后對黃瓜枯萎病菌進行生物熏蒸。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，采用水蒸氣蒸餾法提取醉蝶花莖葉包括以下步驟：將醉蝶花莖葉粉碎，加蒸餾水，混勻，加氯化鈉；將揮發油提取器與回流冷凝管連接，從冷凝管上端加入蒸餾水使充滿揮發油測定器的刻度部分，并溢流入燒瓶為止；加熱至沸，并保持連續沸騰，至測定器中的油面不再變化；放置；開啟活塞，使油面下降與0刻度平齊，收集揮發油并用色譜純乙酸乙酯稀釋。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，還包括GC/MS分析步驟。

10.根據權利要求7-9任一項所述的應用，其特征在于，所述醉蝶花揮發成分提取物包括牡丹酚、芳樟醇和茶香螺烷一種或幾種的混合。