[發(fā)明專利]一種右旋糖酐蔗糖酶突變體及其制備方法與應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010730704.X | 申請日： | 2020-07-27 |
| 公開（公告）號： | CN111826363A | 公開（公告）日： | 2020-10-27 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 馬江鋒;姜岷;李進;王義婭;吳昊 | 申請（專利權(quán)）人： | 南京工業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/10 | 分類號： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/18;C12P19/08;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京德崇智捷知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11467 | 代理人： | 王斌 |
| 地址： | 211816 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 右旋糖酐 蔗糖 突變體 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種催化生產(chǎn)微分子量右旋糖酐的右旋糖酐蔗糖酶突變體TB-7，其特征在于，所述突變體TB-7右旋糖酐蔗糖酶氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述右旋糖酐蔗糖酶突變體TB-7，其特征在于，所述突變體最適pH為5.5，最適溫度為30℃，催化時間為4h。
3.一種編碼權(quán)利要求1所述右旋糖酐蔗糖酶突變體TB-7的編碼基因TB-7，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的包含右旋糖酐蔗糖酶突變體TB-7編碼基因TB-7的重組載體。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的包含右旋糖酐蔗糖酶突變體TB-7編碼基因TB-7的重組菌。
6.一種制備權(quán)利要求1所述右旋糖酐蔗糖酶突變體TB-7的方法，其特征在于，按以下步驟進行：
1)將TB-7的編碼基因和表達載體pET28a(+)相連接，并將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21，獲得包含TB-7的重組菌株；
2)培養(yǎng)重組菌株，誘導(dǎo)重組突變內(nèi)右旋糖酐蔗糖酶的表達；
3)高壓勻漿破碎含重組菌株的菌液，離心獲得含右旋糖酐蔗糖酶TB-7的酶液；
4)對酶進行活性測定。
7.根據(jù)權(quán)利要求1～6任意一項所述催化生產(chǎn)微分子量右旋糖酐的右旋糖酐蔗糖酶突變體TB-7的應(yīng)用。
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