[發(fā)明專利]一株貝萊斯芽孢桿菌及其在減輕蘋果連作障礙中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010714630.0
• 申請(qǐng)日: 2020-07-23
• 公開（公告）號(hào): CN111876351B
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尹承苗;閆助冰;毛志泉;陳學(xué)森;沈向;胡艷麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N9/42;C12N9/54;A01B79/00;B09C1/10;A01N63/22;A01P21/00;C12R1/07
• 代理公司: 濟(jì)南譽(yù)豐專利代理事務(wù)所(普通合伙企業(yè)) 37240
• 代理人: 薛鵬喜

本發(fā)明公開了一株貝萊斯芽孢桿菌及其在減輕蘋果連作障礙中的應(yīng)用，該菌株已于2020年6月10日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其生物保藏號(hào)為：CGMCC NO.20057。本發(fā)明提供的貝萊斯芽孢桿菌XC1是一種極具開發(fā)潛力的新型生防菌，其對(duì)尖孢鐮孢菌、串珠鐮孢菌、層出鐮孢菌和腐皮鐮孢菌均具有較強(qiáng)的抑制效果，其中對(duì)尖孢鐮孢菌的抑制率最高，達(dá)到79.83％。該菌株還能高產(chǎn)蛋白酶、纖維素酶等拮抗酶；降低土壤中根皮苷、根皮素、阿魏酸、肉桂酸等酚酸類物質(zhì)含量；促進(jìn)蘋果樹植株生長(zhǎng)；在減輕蘋果樹連作障礙方面具有優(yōu)異的效果，為蘋果連作障礙的生物防治提供了理論依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株貝萊斯芽孢桿菌及其在減輕蘋果連作障礙中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著品種更新?lián)Q代和種植面積的增加，我國(guó)有大規(guī)模的老果園需更新改造，老果園更新時(shí)面臨的連作障礙現(xiàn)象非常普遍。王功帥(2018)和王曉寶等(2018)研究表明，鐮孢菌屬有害真菌是造成環(huán)渤海灣和西北黃土高原地區(qū)蘋果連作障礙發(fā)生的主要病原菌；徐文鳳(2011)和劉志(2013)分別從環(huán)渤海灣蘋果產(chǎn)區(qū)的老齡蘋果園土壤中分離到大量的尖孢鐮孢菌(F.oxysporum)、串珠鐮孢菌(F.moniliforme)、腐皮鐮孢菌(F.solani)和層出鐮孢菌(F.proliferatum)，并驗(yàn)證其對(duì)平邑甜茶幼苗具有強(qiáng)致病性，王功帥(2018)通過接種試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)這四種鐮孢菌對(duì)平邑甜茶具有強(qiáng)烈的致病性，接種后都出現(xiàn)了生長(zhǎng)停滯，葉片黃化、脫落的現(xiàn)象，接種病原菌2個(gè)月后死亡率超過50％以上。因此，我們認(rèn)為這四種鐮孢菌是引起蘋果連作障礙的致病菌。連作障礙會(huì)導(dǎo)致蘋果果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)下降、病蟲害加重、樹勢(shì)衰弱甚至死亡，對(duì)果農(nóng)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此，研究出一種高效、環(huán)保的防控措施來減輕蘋果連作障礙具有非常重要的意義。

生物防治是利用有益微生物抑制土壤中病原菌的一種安全、環(huán)保、經(jīng)濟(jì)效益高且長(zhǎng)效的防治措施，已成為當(dāng)今研究的一大熱點(diǎn)。杜淑濤等(2010)發(fā)現(xiàn)，貝萊斯芽孢桿菌對(duì)白菜黑斑病致病菌蕓薹鏈格孢有較高拮抗活性，田間試驗(yàn)病指防效達(dá)到79.07％。Liu等(2017)報(bào)道，B.velezensis LS69對(duì)胡蘿卜軟腐病果膠桿菌和梨火疫病菌有著強(qiáng)烈的抑菌效果。同時(shí)，某些植物根際促生菌可降解土壤自毒物質(zhì)，酚酸類物質(zhì)是導(dǎo)致蘋果連作障礙的主要自毒物質(zhì)，接種有益微生物分解連作土壤中的酚酸類物質(zhì)，有利于農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，是一項(xiàng)經(jīng)濟(jì)有效的生防措施。祁國(guó)振等(2016)從根際土中分離出降解蘋果自毒物質(zhì)的降解菌，有利于改善連作蘋果園土壤環(huán)境，錢娜等(2019)篩選分離出苯甲酸降解菌，并研究其降解特性，為利用降解菌緩解花生連作障礙提供資源保障和科學(xué)依據(jù)。然而，目前少有芽孢桿菌在防治蘋果連作障礙方面的研究。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，發(fā)明人經(jīng)長(zhǎng)期的技術(shù)與實(shí)踐探索，從連作蘋果園健康果樹根際土中分離得到一株貝萊斯芽孢桿菌XC1，該菌株對(duì)尖孢鐮孢菌、串珠鐮孢菌、層出鐮孢菌和腐皮鐮孢菌均具有拮抗作用，能夠高產(chǎn)蛋白酶和纖維素酶，對(duì)土壤中的酚酸類物質(zhì)具有優(yōu)異的降解效果，可以促進(jìn)蘋果植株生長(zhǎng)和減輕蘋果連作障礙。

具體的，本發(fā)明涉及以下技術(shù)方案：

本發(fā)明的第一方面，提供了一株貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)XC1，該菌株已于2020年6月10日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào))，其生物保藏號(hào)為：CGMCC NO.20057。

所述貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)XC1分離自連作蘋果園健康果樹根際土壤，具有如下特征：

在LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后，菌落乳白色，不透明，形狀最初為圓形，邊緣整齊，繼而邊緣開始褶皺不整齊，向四周呈云霧狀擴(kuò)散，菌落中間有凸起，挑開菌落后有粘液狀分泌物。在LB液體培養(yǎng)基中靜止培養(yǎng)后有菌膜形成，好氧。菌體呈桿狀，有芽孢，革蘭氏染色陽性。