[發明專利]一種水產品中奧美普林含量的檢測方法

有效

• 申請號: 202010713875.1
• 申請日: 2020-07-22
• 公開（公告）號: CN112034054B
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發明（設計）人: 熊剛;李平;陳忠河
• 申請（專利權）人: 廈門鑒科檢測技術有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭;姜謐

本發明公開了一種水產品中奧美普林含量的檢測方法，用乙酸乙酯提取，提取液減壓濃縮至干，用乙腈+0.1mol/L鹽酸溶液(1+1)溶液洗脫，過混合型陽離子交換柱(MCX)凈化，10％乙腈水(含0.1％甲酸)溶解。以乙腈和0.3％甲酸水溶液為流動相，C18柱進行分離，高效液相色譜(含二極管陣列檢測器)測定。本發明通過二極管陣列檢測器特征光譜可以快速準確定性、定量水產品中的奧美普林的殘留量，檢出限可達到0.006mg/kg，定量下限可達到0.02mg/kg。

技術領域

本發明屬于獸藥檢測技術領域，具體涉及一種水產品中奧美普林含量的檢測方法。

背景技術

奧美普林為磺胺類增效劑，對多數革蘭氏陽性菌和陰性菌有效，磺胺類藥物單獨使用，會使細菌很易產生耐藥性，與磺胺增效藥物同時使用，可使細菌的葉酸的葉酸代謝收到雙重阻斷，由于磺胺類藥物在體內作用時間和代謝時間較長，攝入體內的磺胺類藥物可能在人體內蓄積，當蓄積到一定濃度時對人體的機能是有害的。

CN103884790A公開了一種動物源性食品中獸藥多殘留的測定方法，步驟如下：稱取樣品，添加醋酸乙腈溶液，振蕩提取后，進行離心，將離心后得到的乙腈提取液裝入有混合填料的離心管中，振蕩離心，吸取凈化液，氮吹濃縮，定容后UPLC/MS/MS檢測，該技術方案針對動物產品中磺胺類(包括奧美普林)、喹諾酮類、β激動劑類等107種獸藥能夠進行定性、定量，檢出限完全能夠滿足檢測需求，但該方法前期投入成本很高，試樣處理復雜，對人員要求高，且檢測過程繁瑣，效率低。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術缺陷，提供一種水產品中奧美普林含量的檢測方法。

本發明的技術方案如下：

一種水產品中奧美普林含量的檢測方法，包括如下步驟：

(1)稱取奧美普林標準品，用甲醇為溶劑配制標準儲備液；

(2)精確稱取待測樣品，加入無水硫酸鈉和乙酸乙酯進行均質，再將所得物料經離心后獲取上清液；

(3)將上述上清液減壓蒸干后，加入乙腈、濃度為0.1mol/L的鹽酸和乙腈飽和正己烷進行渦旋洗脫，獲得第一洗脫液；

(4)將上述第一洗脫液經離心分層后，取其下層溶液與濃度為0.1mol/L的鹽酸渦旋混合后靜置，獲得待凈化液；

(5)將上述待凈化液的下層溶液過經過預活化的混合型陽離子交換柱，再用濃度為0.1mol/L的鹽酸和甲醇洗滌，棄去洗液，然后用濃度為5wt％的氨水甲醇溶液洗脫，獲得第二洗脫液；

(6)將上述第二洗脫液用氮氣吹干，加入濃度為10wt％的乙腈水溶液進行溶解，所得物料過有機濾膜后，獲得試樣，將該試樣送入具有二極管陣列檢測器的液相色譜儀進行檢測，獲得試樣中的奧美普林的色譜峰面積，其中檢測的具體參數為：采用C18柱，流速為1.0mL/min，進樣量為20μL，流動相為0.3％甲酸水溶液∶乙腈＝85∶15，等度洗脫，檢測波長為270nm，分析時間為15min；

(7)用濃度為10wt％的乙腈水溶液稀釋標準儲備液，配制成濃度為0.2-2μg/mL的若干標準溶液，將該若干標準溶液分別過有機濾膜后，以與步驟(6)相同的具體參數送入具有二極管陣列檢測器的液相色譜儀進行檢測，獲得若干標準溶液的峰面積；

(8)以若干標準溶液的濃度為橫坐標，以若干標準溶液的奧美普林的色譜峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線，將步驟(6)所得的色譜峰面積代入該標準工作曲線中，獲得試樣中的奧美普林的濃度；

(9)將步驟(8)所得的試樣中的奧美普林的濃度代入中，即可獲得待測樣品中的奧美普林的殘留量；其中，X為待測樣品中的奧美普林的殘留量，單位為mg/kg；c為試樣中的奧美普林的濃度，單位μg/mL；V為試樣的最終定容體積，單位為mL；m為待測樣品的質量，單位為g。