[發(fā)明專利]一種牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010697782.4 | 申請(qǐng)日： | 2020-07-20 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN111631139A | 公開(kāi)（公告）日： | 2020-09-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 莫昭展;林桂安;盧娟 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 玉林師范學(xué)院 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | A01H4/00 | 分類(lèi)號(hào)： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 廣州海心聯(lián)合專利代理事務(wù)所(普通合伙) 44295 | 代理人： | 王洪娟;馬赟齋 |
| 地址： | 537000 廣西*** | 國(guó)省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 種牛 白藤 葉片 組織 誘導(dǎo) 莖芽擴(kuò)繁 方法 | ||
1.一種牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)外植體采集：采集牛白藤單株上的葉片作為外植體；
(2)愈傷組織培養(yǎng)：對(duì)外植體消毒后切割，并誘導(dǎo)培養(yǎng)形成愈傷組織；
(3)不定芽培養(yǎng)：對(duì)愈傷組織進(jìn)行不定芽培養(yǎng)，得不定芽叢；
(4)生根培養(yǎng)：對(duì)不定芽叢進(jìn)行生根培養(yǎng)，得試管苗；
(5)移植：將試管苗進(jìn)行移植，得種苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：所述步驟(1)中采集無(wú)病蟲(chóng)害、且葉齡為10-15天的新葉葉片作為外植體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：所述步驟(2)中：先對(duì)外植體用水進(jìn)行沖洗，然后使用酒精消毒，再使用升汞溶液消毒并沖洗；然后將葉片切割并接種到愈傷組織培養(yǎng)基上培養(yǎng)25-30天形成愈傷組織。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：所述愈傷組織培養(yǎng)基的條件為：
LS培養(yǎng)基，1.0-3.0mg/L核黃素、0.1-0.5mg/L活性碳、0.5-1.0mg/L CPPU、0.1-0.5mg/LNAA、25-30g/L蔗糖、3.0-4.0g/L瓊脂，pH為5.4-5.6。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：所述步驟(3)中，將愈傷組織與培養(yǎng)基接觸的組織切除，然后將愈傷組織切成塊后接種到不定芽培養(yǎng)基培養(yǎng)25-30天；
所述不定芽培養(yǎng)基的條件為：
LS培養(yǎng)基，1.0-3.0mg/L核黃素、0.1-0.5mg/L活性碳、0.1-0.5mg/L ZT、0.05-0.1mg/LNAA、25-30g/L蔗糖、3.0-4.0g/L瓊脂，pH為5.4-5.6。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：所述步驟(4)中，將不定芽叢分成單個(gè)的不定芽，然后接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)25-35天；
所述生根培養(yǎng)基的條件為：
1/2MS培養(yǎng)基，0.1-0.5mg/L SA、0.5-1.0mg/L NAA、25-35g/L蔗糖、3.0-4.0g/L瓊脂，pH為5.4-5.6。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：所述步驟(5)中：將試管苗轉(zhuǎn)移至大棚內(nèi)煉苗，然后將試管苗的根部洗凈后移植于基質(zhì)中栽培成牛白藤種苗。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：所述基質(zhì)為酸性黃泥土；酸性黃泥土的ph范圍為5.5-5.8。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：在步驟(2)中，培養(yǎng)條件為：溫度23-25℃，光照強(qiáng)度為1500-2000lx，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天，濕度為60-70％。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的牛白藤葉片愈傷組織誘導(dǎo)莖芽擴(kuò)繁的方法，其特征在于：在步驟(3)和步驟(4)中，培養(yǎng)條件為：溫度25-28℃，光照強(qiáng)度為2500-3000lx，光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，濕度為60-70％。
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