[發明專利]一種利用發酵法從玉米蛋白粉中定向制備富含LPP水解物的方法

有效

• 申請號: 202010660545.0
• 申請日: 2020-07-10
• 公開（公告）號: CN111909978B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 黃國清;周會欽;肖軍霞;張志凱;榮慶軍;譚海剛
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/425;C07K5/083;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/14;A23L33/18;C12R1/225
• 代理公司: 青島合創知識產權代理事務所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

本發明公開了一種利用發酵法從玉米蛋白粉中定向制備富含LPP水解物的方法，包括以下步驟：（1）將研磨過篩的玉米蛋白粉配制發酵培養基后，接入活化且擴大培養后的瑞士乳桿菌發酵，得到發酵液；（2）所述發酵液高溫滅菌后冷卻至室溫，并高速離心，收集上清液；（3）所述上清液經超濾膜超濾，待透過液中無蛋白質檢出時收集透過液；（4）所述透過液使用樹脂進行脫苦和脫色處理，得到脫色液；（5）將脫色液進行冷凍干燥或噴霧干燥，得到富含LPP的玉米蛋白粉水解物粉末。本發明明顯提高了玉米蛋白粉的水解度和蛋白質回收率，對玉米蛋白粉資源的利用更加充分。

技術領域

本發明屬于蛋白質水解技術領域，具體涉及一種利用發酵法從玉米蛋白粉中定向制備富含LPP水解物的方法。

背景技術

高血壓被公認為是冠心病、心力衰竭、腎功能不全和視力障礙等疾病的主要危險因素，是世界范圍內重要的公共衛生挑戰。目前常用的降血壓藥物多為化學合成，患者在使用過程中容易發生多種不良反應。由于高血壓患者需要長期服藥，這使得人們對安全性好、對高血壓有預防和治療作用的替代品產生了需求。

血管緊張素轉化酶抑制肽（ACEIP）又稱降血壓肽，是由水解天然蛋白質而獲得的一類具有血管緊張素轉化酶（ACE）抑制活性和降血壓作用的小肽。與現有的ACE抑制劑類合成降血壓藥物如哌哚普利、群多普利等相比，ACEIP可以通過日常膳食攝入，具有安全性好、無毒副作用、對正常血壓無影響、對高血壓既有治療作用又有預防功效等顯著特點。目前研究得到了許多具有體外降血壓活性的ACEIP，但是這些ACEIP需要通過口服的方式攝入，其在經過胃腸道時極易被各種蛋白酶及強酸性環境水解而失去原先的結構和活性；而且ACEIP只有進入血液循環才能發揮降血壓作用，但很多ACEIP不能被人體直接吸收。因此，雖有大量ACEIP被分離鑒定出來，但是經臨床證實具有明確體內降血壓功效的ACEIP僅有Ile-Pro-Pro（IPP）、Val-Pro-Pro（VPP）和Leu-Pro-Pro（LPP）三種三肽。

IPP、VPP和LPP主要來源于牛奶中的酪蛋白，因此被合稱為乳三肽。這三種三肽對ACE具有很強的抑制活性，而且對胃腸道和血液中的蛋白酶和肽酶具有很強的抗性，因而能被完整吸收進入血液循環；還可有效降低高血壓患者的血壓，并且不影響正常血壓，具有很高的安全性。但目前以乳蛋白為原料生產含IPP和VPP的水解物的方法不能滿足素食主義者的需求。

玉米蛋白粉是玉米濕磨工藝加工淀粉的副產品，主要成分為玉米醇溶蛋白（α、β、γ、δ）。其中，對γ-醇溶蛋白的測序結果表明其中的三個組分均含有至少由6個Pro-Pro-Pro-Val-His-Leu（PPPVHL）重復單位組成的串聯重復序列，該段序列與其后續氨基酸殘基共形成了至少6個LPP片段，其序列分別為-CQP PPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPP-、-QP PPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPP-和-QP PPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPP-，遠高于LPP、VPP和IPP在β-酪蛋白和κ-酪蛋白中的出現頻率；另外，LPP也存在于α-玉米醇溶蛋白及其它蛋白組分中，因此玉米蛋白粉是LPP的良好來源。如果能夠將LPP從玉米蛋白粉中定向水解釋放出來，這對于拓展LPP除酪蛋白之外的新來源、開發新型的基于乳三肽的降血壓功能食品及功能食品組件具有重要意義。

發明內容

本發明提供了一種利用發酵法從玉米蛋白粉中定向制備富含LPP水解物的方法，本發明以瑞士乳桿菌菌株作為發酵劑對玉米蛋白粉進行發酵，經過超濾、脫色、干燥制得富含LPP水解物的粉末。

為實現上述發明目的，本發明采用以下技術方案予以實現：

本發明提供了一種利用發酵法從玉米蛋白粉中定向制備富含LPP水解物的方法，包括以下步驟：

（1）將研磨過篩的玉米蛋白粉配制發酵培養基后，接入活化且擴大培養后的瑞士乳桿菌發酵，得到發酵液；