[發明專利]人源降鈣素原的單克隆抗體其制備方法和用途在審
| 申請號： | 202010638636.4 | 申請日： | 2015-07-16 |
| 公開（公告）號： | CN111793132A | 公開（公告）日： | 2020-10-20 |
| 發明（設計）人： | 葉森;唐勇;何仕釗;汪金鳳 | 申請（專利權）人： | 南京諾爾曼生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C07K16/26 | 分類號： | C07K16/26;G01N33/74;G01N33/577;C12N5/20;C07K14/585;C12N15/70;C12N15/16;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京布瑞知識產權代理有限公司 11505 | 代理人： | 孟潭 |
| 地址： | 210000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 降鈣素 單克隆抗體 制備 方法 用途 | ||
1.一種與人源降鈣素原特異性結合的抗降鈣素原抗體，其中所述抗降鈣素原抗體與保藏號為CGMCC No.10417的雜交瘤細胞系產生的降鈣素原單克隆抗體特異性結合相同的降鈣素原表位。
2.根據權利要求1所述的抗降鈣素原抗體，其包含保藏號為CGMCC No.10417的雜交瘤細胞系產生的降鈣素原單克隆抗體的人源化序列。
3.根據權利要求1所述的抗降鈣素原抗體，其中所述抗降鈣素原抗體是單克隆抗體。
4.根據權利要求1所述的抗降鈣素原抗體，其中所述抗降鈣素原抗體特異性結合具有氨基酸序列為RLLLAALVQDYV(SEQ ID NO:1)的表位。
5.根據權利要求1所述的抗降鈣素原抗體，其中所述抗降鈣素原抗體獲得自保藏號為CGMCC No.10417的雜交瘤細胞系。
6.含有權利要求1-5任一項所述的抗降鈣素原抗體的免疫檢測試劑，其用于檢測或者定量降鈣素原或其片段。
7.根據權利要求1-5任一項所述的抗降鈣素原抗體的用途，其用于制備檢測或者定量降鈣素原或其片段的免疫檢測試劑的用途。
8.根據權利要求1-5任一項所述的抗降鈣素原抗體的用途，其用于制備檢測或者定量降鈣素原或其片段的試劑盒的用途。
9.含有權利要求1-5任一項所述的抗降鈣素原抗體的試劑盒，其用于檢測或者定量降鈣素原或其片段。
10.一種產生降鈣素原單克隆抗體的雜交瘤細胞系，其保藏號為CGMCC No.10417。
11.一種制備抗降鈣素原抗體的方法，包括以下步驟：
(1)對降鈣素原N端氨基酸殘基進行突變，獲得與突變后氨基酸殘基序列相對應的核苷酸序列；
(2)將所述核苷酸序列插入到原核表達載體中，進行誘導表達以及蛋白純化；
(3)將純化蛋白作為抗原免疫動物，取其脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合制備雜交瘤細胞，經篩選獲得可穩定分泌抗降鈣素原抗體的雜交瘤細胞，并獲得相應單克隆抗體。
12.根據權利要求11所述的方法，其中所述突變是針對降鈣素原第1至57位氨基酸殘基進行的。
13.根據權利要求11-12任一項所述的方法，其中突變后的降鈣素原氨基酸序列為SEQID NOs:2-4。
14.根據權利要求11-13任一項所述的方法制備的抗體。
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