[發明專利]心肌肌鈣蛋白I檢測試劑和制備方法以及心肌肌鈣蛋白I檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202010629295.4
• 申請日: 2020-07-02
• 公開（公告）號: CN111735965B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 張明琛;孫佳;李博飛
• 申請（專利權）人: 北京美聯泰科生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/543;G01N33/535
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 陳文森

本發明涉及心肌肌鈣蛋白I檢測試劑和制備方法以及心肌肌鈣蛋白I檢測試劑盒。具體涉及心肌肌鈣蛋白I檢測試劑，包括包被抗體溶液、檢測抗體溶液、指示劑溶液；其中，包被抗體包括由抗體1與固定相偶聯得到的抗體固定相偶聯物1，以及由抗體2與固定相偶聯得到的抗體固定相偶聯物2，檢測抗體通過抗體3與標記物偶聯得到；指示劑溶液中包含用于定量檢測標記物濃度的指示劑。本發明還包括該檢測試劑的制備方法及運用該檢測試劑的試劑盒。本發明中，抗體2和抗體3可以分別與心肌肌鈣蛋白I結合，有助于心肌肌鈣蛋白I的充分分離，進而提高該試劑對心肌肌鈣蛋白I的檢測靈敏度。

技術領域

本發明涉及健康檢測的技術領域，尤其是涉及心肌肌鈣蛋白I檢測試劑，本發明還涉及該檢測試劑的制備方法。另外，本發明還涉及心肌肌鈣蛋白I檢測試劑盒。

背景技術

心血管疾病已成為21世紀人類健康的頭號殺手。心肌肌鈣蛋白是目前診斷心肌壞死敏感和特異的首選心肌損傷標志物，是診斷急性心肌梗死(AMI)和對急性冠狀動脈綜合征(ACS)危險分層的主要依據。心肌肌鈣蛋白是由3個亞單位，即心肌肌鈣蛋白C、心肌肌鈣蛋白I及心肌肌鈣蛋白T組成的復合物。心肌肌鈣蛋白I被認為是心肌損傷最特異、最敏感的血清標志物之一，由于其高度的心肌特異性，對于心肌損傷的高度敏感性及較長的窗口期，被大家認為診斷急性心肌梗死的“金標準”。心肌肌鈣蛋白I還具有判斷愈后的價值，對任何冠狀動脈疾患病人，即便其他檢查陰性，只要心肌肌鈣蛋白I增高，應視為具有高危險性，臨床上主要用于心肌梗死、心肌損傷等心臟疾病的輔助診斷，同時對梗死發生、預后及觀察療效具有重要意義。

在現有技術中，對心肌肌鈣蛋白I的檢測主要包括如下方法：側向層析法、酶聯免疫法、時間分辨熒光法等。其中，酶聯免疫法主要通過雙抗體夾心的方法對待測試樣中的心肌肌鈣蛋白I進行固定并檢測。在酶聯免疫法中通常需要使用兩種心肌肌鈣蛋白I的抗體，一種抗體上連接有檢測試劑，另一種抗體與固定相連接。向體系中加入心肌肌鈣蛋白I后，兩種抗體會分別連接于心肌肌鈣蛋白上的兩個位點，之后通過離心、磁分離等分離手段將固定相分離，并通過指示劑對分離后的物料中含有的檢測試劑的量進行測定，即可通過分離得到的物料中檢測試劑的含量定量計算得到體系中心肌肌鈣蛋白I。通過酶聯免疫法對心肌肌鈣蛋白I的含量進行測定，具有較高的精確度和靈敏度。

但是在現有技術中，在將心肌肌鈣蛋白I與抗體的結合體從反應體系中分離的過程中，許多步驟都會產生物料損失，例如在反應過程中肌鈣蛋白I可能無法與抗體充分反應、在分離過程中固定相可能無法完全分離等。當樣品中心肌肌鈣蛋白I濃度較低時，反應和分離過程中產生的損失可能會導致最終檢測時心肌肌鈣蛋白I無法被測出，從而導致檢測的靈敏度降低。

發明內容

針對現有技術存在的不足，本發明的第一個發明目的是提供一種靈敏度較高、檢出限較低的心肌肌鈣蛋白I檢測試劑。

本發明的第二個發明目的是提供上述心肌肌鈣蛋白I檢測試劑的制備方法。

本發明的第三個發明目的是提供心肌肌鈣蛋白I檢測試劑盒，通過上述心肌肌鈣蛋白I檢測試劑對心肌肌鈣蛋白進行檢測。

本發明的第一個發明目的是通過以下技術方案得以實現的：心肌肌鈣蛋白I檢測試劑，包括分開存儲并聯合使用的包被抗體溶液、檢測抗體溶液、指示劑溶液；

其中，包被抗體包括由抗體1與固定相偶聯得到的抗體固定相偶聯物1，以及由抗體2與固定相偶聯得到的抗體固定相偶聯物2，檢測抗體通過抗體3與標記物偶聯得到；所述指示劑溶液中包含用于定量檢測標記物濃度的指示劑，其中，抗體1、抗體2和抗體3中任意兩者之間與心肌肌鈣蛋白I的結合位點均不重復。