[發(fā)明專利]用于21-三體風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)的試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010627219.X
• 申請(qǐng)日: 2020-07-02
• 公開（公告）號(hào): CN111763725A
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 殷建;尹煥才;田晶晶;藺春茂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濟(jì)南國(guó)科醫(yī)工科技發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11369
• 代理人: 孔凡玲

1.一種用于21-三體風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)的試劑盒，其特征在于，包括內(nèi)切酶緩沖液體系和PCR反應(yīng)體系，所述PCR反應(yīng)體系包括如下引物組：

針對(duì)檢測(cè)區(qū)域EP1的上游引物：5’-TCGTTATATGGATGCCTTG-3’，下游引物：5’-AACTGTTGGGCTGAACTGA-3’；

針對(duì)檢測(cè)區(qū)域EP2的上游引物：5’-TCATTTTCCTCTCGCTCTGC-3’，下游引物：5’-CACTCAGGGTCCTCAGTTCG-3’；

針對(duì)檢測(cè)區(qū)域EP3的上游引物：5’-GCGCCTAGCACAGACTCTTC-3’，下游引物：5’-TCAAATACCCGCACAGTTCA-3’；

針對(duì)檢測(cè)區(qū)域EP4的上游引物：5’-TTCTGTGCAACTTTCGCTTG-3’，下游引物：5’-CGTCTCTCACTCCCTGCACT-3’；

針對(duì)檢測(cè)區(qū)域EP5的上游引物：5’-CCGTGTGGCCAGAGGTG-3’，下游引物：5’-AAAGGGCCAGGTCGGGA-3’；

針對(duì)檢測(cè)區(qū)域EP6的上游引物：5’-GACCCAGACGATACCTGGAA-3’，下游引物：5’-GCTGAACAAAACTCGGCTTC-3’；

針對(duì)檢測(cè)區(qū)域EP7的上游引物：5’-TAGCTGGCACCCGCTGG-3’，下游引物：5’-GTGTGGGGTTGCACGCGC-3’；

針對(duì)檢測(cè)區(qū)域EP8的上游引物：5’-AGACCTCCGGTTTCTGGTTT-3’，下游引物：5’-TTCCAGAACTTCCCAGCAAC-3’；

其中，上述檢測(cè)區(qū)域均在21號(hào)染色體上，且EP1的基因位置為：42357214-42357340bp，EP2的基因位置為：38506854-38507163bp，EP3的基因位置為：36706480-36706894bp，EP4的基因位置為：44284020-44284209bp，EP5的基因位置為：36980806-36980885bp，EP6的基因位置為：29136735-29136844bp，EP7的基因位置為：50340771-50340692bp，EP8的基因位置為：160711942-160711789bp。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于21-三體風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)的試劑盒，其特征在于，所述內(nèi)切酶緩沖液體系包括Cutsmart緩沖液、HpaII酶和無(wú)菌水。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于21-三體風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應(yīng)體系還包括Premix溶液和無(wú)菌雙蒸水。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于21-三體風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)的試劑盒，其特征在于，該試劑盒的使用方法為：

1)、將提取的孕周12的孕婦外周血與所述內(nèi)切酶緩沖液體系混合，然后37℃水浴培養(yǎng)4h，之后置于80℃水浴鍋中熱失活20min；

2)將所述步驟2)得到的混合體系與所述PCR反應(yīng)體系混合，進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)；

3)完成PCR反應(yīng)后計(jì)算EP1-EP6相對(duì)于EP7和EP8的表達(dá)豐度，任一組中表達(dá)豐度大于1.4的基因數(shù)≥4時(shí)，判斷存在21-三體風(fēng)險(xiǎn)。