[發明專利]一種急性髓系白血病誘導分化治療耐藥的分子標志物及其應用

有效

• 申請號: 202010624681.4
• 申請日: 2020-07-02
• 公開（公告）號: CN111676290B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 王偉佳;韓慧
• 申請（專利權）人: 王偉佳
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/574
• 代理公司: 蘇州國誠專利代理有限公司 32293
• 代理人: 王麗

本發明公開了一種輔助判斷AML患者誘導分化治療預后情況的生物標志物，該生物標志物為ICAT。本發明通過ICAT診斷試劑和診斷試劑盒的研制和應用，可使得AML患者的預后診斷更加方便易行，為臨床醫生快速準確掌握患者病情，為臨床治療效果奠定基礎。

技術領域

本發明專利涉及到一種標志物，具體的涉及急性髓系白血病誘導分化治療耐藥的分子標志物及其應用。

背景技術

白血病是由于髓源和淋巴源的血前體細胞分化和增殖功能失調導致的一種血液性疾病。有研究表明，白血病在小兒惡性腫瘤中的發病率最高，達35％左右，被認為是14歲以下小兒癌癥中的“頭號殺手”。全世界15歲以下兒童白血病的發病率為3～4/10萬人，在我國每年約有5000左右的兒童發生白血病。它不僅給患者家庭帶來巨大的痛苦和經濟負擔，而且給社會帶來沉重的負擔。白血病最常見的類型為急性淋巴細胞白血病(acutelymphocytic leukaemia，ALL)和急性髓系細胞白血病(acute myeloid leukaemia，AML)。其中AML是髓系造血干/祖細胞惡性疾病，發病率占小兒白血病的30％。以骨髓與外周血中原始和幼稚細胞異常增生為主要特征，臨床表現為貧血、感染、發熱、臟器浸潤及代謝異常等。根據FAB分型標準，AML共分M1-M7等7個型，即M1：未分化的原粒細胞白血病；M2：部分分化的原粒細胞白血病；M3：急性早幼粒細胞白血病；M4：急性粒、單核細胞白血病；M5：急性單核細胞白血病；M6：急性紅血病或紅白血病；M7：急性巨核細胞白血病。AML的發病機理大多與癌基因的融合蛋白有關，是染色體移位或倒置引起的。隨著聯合化療和造血干細胞移植技術的應用，目前白血病的存活率大為改觀，但治療相關的死亡率仍然高達20％。目前臨床化療手段可以使大部分AML患者達到控制病情惡化或者完全緩解的目的，但實現長期緩解的結果并不理想，初始治療無效或者初始治療有效后期復發的原因大多是化療耐藥；且AML具有極強的臨床異質性，導致該類患者5年存活率僅為26.6％。很多研究停留在細胞耐藥的分子機制層面，尚未找到切實有效的實時監測AML化療耐藥的手段，因此，尋找新的分子標記物顯得尤為重要。

前期研究中，本課題組采用比較蛋白質組學技術，應用全反式維甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)和甲磺酸甾醇類藥物(編號：NSC67657)分別誘導HL60細胞向粒系和單核系分化，發現單核系分化特異表達差異蛋白：連環蛋白β相關蛋白1(β-catenin-interacting protein-1，ICAT)。ICAT蛋白是β-連環素蛋白(β-catenin)依賴的Wnt信號通路中的關鍵蛋白質分子，它可以結合β-catenin蛋白，發揮其競爭性抑制作用，從而影響了整個Wnt/β-catenin/Tcf信號途徑的激活。ICAT在NSC67657誘導HL60細胞單核系分化過程中表達升高，而在粒系分化和非處理細胞中表達無顯著性差異。前期研究發現，由ICAT調節的Wnt/β-catenin信號通路顯著干擾了甾醇類藥物NSC67657對HL60細胞的化療表現，如果外源性高表達ICAT蛋白可以顯著提高HL60細胞對NSC67657的敏感性，反之，若沉默細胞內ICAT基因，可以顯著抑制藥物的“高效”作用。說明細胞內ICAT蛋白的表達水平能夠干擾化療效果。有趣的是，NSC67657可誘導THP-1細胞向單核系分化，并激活ICAT基因的表達，但僅是該基因的高表達并不足以誘導THP-I細胞分化，也不會增加THP-1細胞對NSC67657藥物作用的敏感性。這就提示我們，ICAT蛋白可能不是NSC67657誘導細胞分化的作用靶點，或者說ICAT促進髓系白血病細胞的單核系分化可能僅存在于粒一單核系祖細胞階段，而對進入了單核系門檻的腫瘤細胞沒有明顯影響。

目前對AML的預后判斷主要根據患者年齡、染色體核型等指標。但即使是年齡、染色體核型等因素完全相同的患者，他們的預后也不盡相同。因此，為了獲得更好的治療效果，提高患者的存活率，需要早期判斷AML的預后指標指導制定合適的治療方案。故尋找有效的實時監測AML化療耐藥指標具有重要現實意義。但是，現階段有效的判斷指標嚴重不足，從基因蛋白水平上研究尋找預后相關的指標已成為研究熱點。目前尚缺乏能夠用于預測AML患者預后效果的有效生物標志物。

發明內容