[發明專利]目的蛋白純化方法在審
| 申請號: | 202010598841.2 | 申請日: | 2020-06-28 |
| 公開(公告)號: | CN113845560A | 公開(公告)日: | 2021-12-28 |
| 發明(設計)人: | 趙雪冰;王妮 | 申請(專利權)人: | 佛山漢騰生物科技有限公司;廣州漢騰生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07K1/22 | 分類號: | C07K1/22 |
| 代理公司: | 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 肖陽 |
| 地址: | 528315 廣東省佛山市順德區*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 目的 蛋白 純化 方法 | ||
1.一種目的蛋白純化方法,其特征在于,包括以下步驟:
利用洗脫緩沖液對親和層析柱進行洗脫處理,以便獲得含有目的蛋白的洗脫液,所述親和層析柱加載有待測樣品,所述待測樣品中含有待純化目的蛋白,
其中,所述洗脫緩沖液中含有醇類物質。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述醇類物質包括選自甘露醇、木糖醇和乙二醇的至少之一。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述醇類物質在所述洗脫緩沖液中的體積分數為1%-16%,優選地,所述醇類物質在所述洗脫緩沖液中的體積分數為10%。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述洗脫緩沖液包括選自檸檬酸緩沖液、乙酸鹽緩沖液和甘氨酸緩沖液的至少一種。
5.根據權利要求2~5任一項所述的方法,其特征在于,所述洗脫緩沖液的pH為3-4。
6.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述洗脫緩沖液的pH為3.4。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,使用預裝有中和液的容器收集所述洗脫液。
8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述待測樣品包括選自發酵液或細胞培養物的至少之一。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述親和層析柱為Protein A親和層析柱、Protein G親和層析柱或Protein L親和層析柱。
10.一種通過Protein A親和層析柱純化目的蛋白的方法,其特征在于,包括以下步驟:
利用洗脫緩沖液對親和層析柱進行洗脫處理,以便獲得含有目的蛋白的洗脫液,所述親和層析柱加載有待測樣品,所述待測樣品中含有待純化目的蛋白,
其中,所述洗脫緩沖液為100mM檸檬酸緩沖液,所述洗脫緩沖液中含有10體積%的醇類物質,所述洗脫緩沖液的pH為3.4,所述待測樣品為細胞培養物。
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