[發(fā)明專利]一種獼猴桃資源的離體保存繁育方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010595685.4
• 申請(qǐng)日: 2020-06-28
• 公開（公告）號(hào): CN111587688B
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂海燕;鐘彩虹;李大衛(wèi);陳亮;費(fèi)早霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院武漢植物園
• 主分類號(hào): A01G2/30
• 分類號(hào): A01G2/30;A01H4/00;A01G22/05
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所(普通合伙) 42001
• 代理人: 黃瑞棠

本發(fā)明公開了一種獼猴桃資源的離體保存繁育方法,涉及一種獼猴桃資源的離體保存繁育技術(shù)領(lǐng)域。本方法包括：A、接穗準(zhǔn)備；B、砧木培育；C、無菌嫁接；D、嫁接體生根培養(yǎng)；E、嫁接苗移栽。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果：①可周年進(jìn)行，人為控制生長(zhǎng)環(huán)境條件，為獼猴桃種質(zhì)資源的及時(shí)保存繁育提供了新途徑；②操作簡(jiǎn)單易行、成活率高、應(yīng)用范圍廣，可保存多種作物育種材料。③水培萌芽進(jìn)行接穗準(zhǔn)備，方便快捷，節(jié)約時(shí)間，提高效率。④依賴砧木的優(yōu)良適應(yīng)性，目標(biāo)獼猴桃保育株系的保種成活率可達(dá)95%以上。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及資源的保存繁育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種獼猴桃資源的離體保存繁育方法。

背景技術(shù)

獼猴桃[Actinidia chinensis Planch]是獼猴桃科，獼猴桃屬大型落葉木質(zhì)藤本植物。獼猴桃果實(shí)質(zhì)地柔軟，口感酸甜，營(yíng)養(yǎng)豐富，是老年人、兒童、體弱多病者的滋補(bǔ)果品，被譽(yù)為“水果之王”。它含有豐富的維生素C、維生素A、維生素E以及鉀、鎂、纖維素，世界上消費(fèi)量最大的前26種水果中，獼猴桃最為豐富全面。近年來，獼猴桃種質(zhì)資源收集保存與育種研究都取得了突出性的進(jìn)展，但新材料的保存困難影響著獼猴桃整個(gè)保育研究的順利推進(jìn)。在傳統(tǒng)育種及組織培養(yǎng)過程中獼猴桃都存在相關(guān)育種中間材料保存難、生根難、成活率低，野外引種材料因其道地性而導(dǎo)致引種栽培成活率低，以及季節(jié)因素影響引種及特異獼猴桃材料的嫁接、扦插栽培成活率低等多種問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提出一種獼猴桃資源的離體保存繁育方法，以快速有效的保存獼猴桃育種過程中獲得的中間材料，也為獼猴桃引種工作提供有效的資源保育途徑。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

具體地說，本方法包括下列步驟：

A、接穗準(zhǔn)備：取待保存繁育的獼猴桃硬枝于室內(nèi)水培，硬枝切取成長(zhǎng)20-30cm的截段，硬枝形態(tài)學(xué)上端切口用石蠟密封，形態(tài)學(xué)下端5-8cm浸泡于裝有含0.1%-0.2%多菌靈、30-50mg/L萘乙酸的水溶液敞口瓶中，2-3d更換一次水溶液，給予3500-4000Lux的光照，溫度控制在18-25℃,7-15d萌芽，取萌發(fā)后生長(zhǎng)3-5d的幼嫩腋芽于超凈工作臺(tái)上進(jìn)行消毒處理，去掉嫩芽的葉片，切取長(zhǎng)0.5-1.0cm的莖段接種于快繁培養(yǎng)基上培養(yǎng)，15-20d后莖段腋芽快繁出芽，并于基部再生出多個(gè)芽，45d為一個(gè)繼代周期，長(zhǎng)勢(shì)一致的組培苗經(jīng)過壯苗培養(yǎng)即可成為接穗；

B、砧木培育：室內(nèi)保育的優(yōu)良砧木離體材料經(jīng)過壯苗培養(yǎng)，選取主莖高度達(dá)2-4cm，莖桿直徑0.1-0.4 cm的健壯幼苗即可用于嫁接；

C、無菌嫁接：將砧木主莖從試管內(nèi)取出，超凈工作臺(tái)上置于無菌濾紙上去掉頂端，切取成單個(gè)含1-2個(gè)腋芽、長(zhǎng)1.5-2.5cm的莖段，去掉莖段上葉片，套上塑料軟管，拉滑至形態(tài)學(xué)下端，形態(tài)學(xué)上端切口中央向下橫切一刀，深0.5-0.8cm；同時(shí)取出接穗主莖，同樣切取成單個(gè)含2-3個(gè)腋芽、長(zhǎng)度為0.5-1.5cm的莖段，去掉形態(tài)學(xué)下端基部1-2片葉，并削成楔形，迅速插入砧木橫切口中，保證二者一端的形成層對(duì)齊，再輕輕拉上塑料軟管至嫁接口處固定即完成嫁接操作；

D、嫁接體生根培養(yǎng)：處理好的嫁接材料夾取砧木基部插入生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根誘導(dǎo)；

E、嫁接苗移栽：嫁接處理7d后，接穗腋芽開始萌動(dòng)，有萌發(fā)跡象，7-12d，砧木基部再生形成肉眼可見根生長(zhǎng)點(diǎn)，25-30d接穗腋芽萌發(fā)伸展，肉眼可見嫁接口愈合良好，愈合處膨大，砧木基部生根良好，取出嫁接苗，洗凈根部培養(yǎng)基，蘸取1%的多菌靈溶液5-10s，而后移栽到育苗營(yíng)養(yǎng)缽中，移栽后管理按照常規(guī)組培苗的移栽管理操作進(jìn)行。

本發(fā)明的創(chuàng)新之處在于提供了一種獼猴桃資源的離體保存方法。獼猴桃育種過程中獲得的突變株、雜種胚搶救、體細(xì)胞再生植株、莖尖培養(yǎng)植株等無菌苗直接定植成活率低、生根難，野外獼猴桃引種材料的道地性、引種栽培成活率低，季節(jié)因素影響引種及特異獼猴桃材料的嫁接、扦插栽培成活率，本離體保存繁育方法可解決這些問題。