[發(fā)明專利]一種攜帶凋亡素的外泌體及其應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010587949.1 | 申請日： | 2020-06-24 |
| 公開（公告）號： | CN111778214A | 公開（公告）日： | 2020-10-16 |
| 發(fā)明（設計）人： | 郝瑞峰 | 申請（專利權）人： | 江蘇醫(yī)藥職業(yè)學院 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/49;A61K48/00;A61K38/16;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京思創(chuàng)大成知識產(chǎn)權代理有限公司 11614 | 代理人： | 高爽 |
| 地址： | 224008 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 攜帶 凋亡素 外泌體 及其 應用 | ||
1.一種攜帶凋亡素的外泌體，其特征在于，該外泌體的制備方法包括以下步驟：
(1)采用帶有酶切位點的引物擴增凋亡素基因，得到含凋亡素基因片段；
(2)將含凋亡素基因片段和pEGFP-N1-L載體分別進行雙酶切并連接，轉化大腸桿菌Top10感受態(tài)細胞，得到含凋亡素基因片段的pEGFP-N1-AGL重組質(zhì)粒；
(3)將含凋亡素基因片段的pEGFP-N1-AGL重組質(zhì)粒轉染至非洲綠猴腎成纖維細胞Cos-7，培養(yǎng)該細胞，得到外泌體，經(jīng)超速離心法純化，得到所述攜帶凋亡素的外泌體。
2.根據(jù)權利要求1所述的攜帶凋亡素的外泌體，其中，步驟(1)中所述的引物包括序列為SEQ ID NO：1所示的上游引物和序列為SEQ ID NO：2所示的下游引物；
5’-CCGCTCGAGGCATGAACGCGCTGCAGGAAGATACC-3’(SEQ ID NO：1)
5’-CCGGAATTCTCCGGACAGACGAATGCAACGACGCGC-3’(SEQ ID NO：2)。
3.根據(jù)權利要求1所述的攜帶凋亡素的外泌體，其中，步驟(1)中所述酶切位點為Xho I酶切位點和EcoR I酶切位點。
4.權利要求1-3中任意一項所述的攜帶凋亡素的外泌體在制備治療宮頸癌的藥物中的應用。
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