[發明專利]一種改良酵母上游激活元件及其在魚類中的應用

在審

• 申請號: 202010586965.9
• 申請日: 2020-06-24
• 公開（公告）號: CN111876414A
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: 張運生;楊品紅;劉良國
• 申請（專利權）人: 湖南文理學院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/85;C12N15/67;A01K67/027
• 代理公司: 常德市源友專利代理事務所(特殊普通合伙) 43208
• 代理人: 江妹

1.一種改良酵母上游激活元件，其特征在于，該上游激活元件為非重復序列。

2.根據權利要求1所述的改良酵母上游激活元件，其特征在于，上述改良酵母上游激活元件是由UAS-1、間隔序列、UAS-2、間隔序列、UAS-3、間隔序列、UAS-4、間隔序列、UAS-5、間隔序列、基本啟動子依次組成的非重復序列，其中UAS-1、UAS-2、UAS-3、UAS-4、UAS-5的堿基序列均不相同。

3.根據權利要求2所述的改良酵母上游激活元件，其特征在于，上述改良酵母上游激活元件的多個間隔序列的長度不一致。

4.根據權利要求3所述的改良酵母上游激活元件，其特征在于，其堿基序列如SEQ IDNO.1所示。

5.根據權利要求4所述的改良酵母上游激活元件在提高魚類中目的基因誘導表達率的應用。

6.一種提高魚類中目的基因誘導表達率的方法，其特征在于，構建重組表達載體CK5nrG，將改良酵母上游激活元件克隆到魚類目的基因的上游，其中重組表達載體CK5nrG的堿基序列如SEQ ID NO.5所示；然后顯微注射魚類1個細胞時期的受精卵，獲得P0代轉基因個體，再通過測交篩選獲得雜合子F1代；在P0代及雜合子F1中KalTA4誘導改良酵母上游激活元件下游基因的高效表達。