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[發明專利]一株海洋鏈霉菌及其應用有效

專利信息
申請號: 202010570871.2 申請日: 2020-06-22
公開(公告)號: CN111454869B 公開(公告)日: 2020-10-09
發明(設計)人: 郭琳;謝則平;張淑敏;寇立娟;劉明;張露;付信珍;李志;劉浩 申請(專利權)人: 濱州醫學院
主分類號: C12N1/20 分類號: C12N1/20;C12P17/04;A01N63/28;A01N43/12;C07D307/00;A01P3/00;C12R1/465
代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002 代理人: 李穎
地址: 264000 山*** 國省代碼: 山東;37
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 海洋 霉菌 及其 應用
【權利要求書】:

1.一株海洋鏈霉菌KCB-132,其分類命名為Streptomyces pratensis ,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號為:CGMCC No.19782,保藏時間為2020年5月7日,保藏單位地址為中國北京。

2.一種權利要求1所述的海洋鏈霉菌KCB-132在作為抗菌劑中的應用。

3.按權利要求2所述的海洋鏈霉菌的應用,其特征在于:所述抗菌劑為該菌株的發酵液、菌懸液、濃縮物、分離液中的一種或幾種。

4.按權利要求3所述的海洋鏈霉菌的應用,其特征在于:所述發酵液為將海洋鏈霉菌Streptomyces pratensis KCB-132劃線接種于ISP2固體培養基上,28℃培養直至長出白色的孢子,取孢子體接種到液體培養基,28℃,150-220 rpm/min,搖床培養8-12 d 收獲發酵液;

所述濃縮物為將上述所得發酵液經大孔吸附樹脂洗脫,而后減壓濃縮得總浸膏;總浸膏經硅膠柱層析,以體積比為0:100-100:0的甲醇/二氯甲烷為洗脫液進行梯度洗脫,收集洗脫液體積比2:98的甲醇/二氯甲烷的洗脫組分,將收集的洗脫組分進行ODS反相柱層析,收集含50%有機醇的洗脫液的洗脫部分,濃縮。

5.一種權利要求1所述的海洋鏈霉菌KCB-132在制備Kiamycin E化合物中的應用,該化合物具有抗菌劑的應用;

Kiamycin E化合物的化學式為C19H16O6,其結構式為

6.權利要求5所述的應用,其特征在于:

1)將權利要求1所述的海洋鏈霉菌Streptomyces pratensis KCB-132劃線接種于ISP2固體培養基上,28℃培養直至長出白色的孢子,取孢子體接種到液體培養基,28℃,150-220rpm/min,搖床培養8-12 d 收獲發酵物,過濾發酵物獲得發酵液和菌絲體,發酵液經大孔吸附樹脂柱12nm,50μm,100%乙醇洗脫,用旋轉蒸發儀減壓濃縮,真空度100mbar,轉速100rpm,得總浸膏;

2)總浸膏經正相硅膠 200-300目,54-75μm柱層析,以體積比為0:100-100:0的甲醇/二氯甲烷為洗脫液進行梯度洗脫,流速5ml/min,收集洗脫液體積比2:98的甲醇/二氯甲烷的洗脫組分,將收集的洗脫組分進行ODS C-18,50μm 反相柱層析,以體積比100:0至0:100的水/甲醇為洗脫液進行梯度洗脫,流速2ml/min,收集含50%有機醇的洗脫液,濃縮,進行HPLC制備,以甲醇/水作為流動相,洗脫速率為1ml/min,收集保留時間tR為20.5-22.7min的洗脫部分,得到化合物Kiamycin E。

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