[發明專利]貓杯狀病毒病、貓傳染性鼻氣管炎和貓泛白細胞減少癥三聯疫苗及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010563316.7
• 申請日: 2020-06-19
• 公開（公告）號: CN111632137B
• 公開（公告）日: 2022-12-13
• 發明（設計）人: 陳雅君;李少英;徐樹蘭
• 申請（專利權）人: 鄭州愛科生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/12;A61K39/245;A61K39/23;A61K9/19;A61K47/46;A61P31/14;A61P31/22
• 代理公司: 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125
• 代理人: 冉珊敏

本發明屬于獸用生物制品技術領域，特別是指一種貓杯狀病毒病、貓傳染性鼻氣管炎和貓泛白細胞減少癥三聯疫苗及其制備方法和應用。所述三聯疫苗包括抗原組分和凍干保護劑，其中抗原組分包括貓杯狀病毒BJ株滅活抗原、貓傳染性鼻氣管炎病毒SH株滅活抗原和貓泛白細胞減少癥病毒SY株滅活抗原。本發明采用全懸浮技術制備的貓杯狀病毒、貓傳染性鼻氣管炎病毒和貓泛白細胞減少癥病毒抗原，經滅活、濃縮及凍干等工藝制成貓杯狀病毒病、貓傳染性鼻氣管炎和貓泛白細胞減少癥三聯滅活凍干疫苗，一針免三病，減少了動物的免疫次數，降低了動物應激次數，大大降低了飼養人的經濟成本。

技術領域

本發明屬于獸用生物制品技術領域，特別是指一種貓杯狀病毒病、貓傳染性鼻氣管炎和貓泛白細胞減少癥三聯疫苗及其制備方法和應用。

背景技術

貓杯狀病毒(Feline calicivirus,FCV)是杯狀病毒科杯狀病毒屬的重要成員之一，可引起貓及貓科動物呼吸道傳染病，該病主要侵害6-84日齡幼貓，多發于56-84日齡，1歲以下的貓最易感，日齡越小的貓感染后死亡率越高。其主要臨床癥狀表現為鼻炎、結膜炎、急性口腔潰瘍、肺炎、慢性胃炎和跛行等。自1957年Fastier首次分離鑒定FCV以來，在歐洲、美洲、亞洲均發現FCV，其已呈世界性分布。近年來，由于FCV高度的變異性產生的強毒株可引起嚴重、急性、致死性全身性疾病(Virulent Systemic Disease，VSD)，對貓及貓科動物的健康造成嚴重威脅。

貓傳染性鼻氣管炎，是由貓皰疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus 1，FHV-1)引起的，在幼貓和成年貓中均可發生。主要表現為發熱、眼部及鼻部黏膜損傷和明顯上呼吸道感染癥狀，發病率高達100％，死亡率可達50％，是目前已知最嚴重的貓呼吸道疾病之一。1957年Crandell R.A于美國首次在患病幼貓體內分離得到FHV-1。隨后在越南、荷蘭、英國、日本、匈牙利等地分離到此病。之后我國多次檢測并分離到該病毒。該病在我國呈上升趨勢。

貓泛白細胞減少癥(Feline panleukopenia virus，FPV)，又稱貓瘟、貓傳染性腸炎病毒。是由貓細小病毒引起的一種急性高度接觸性傳染病。主要癥狀為高熱、嘔吐、腹瀉、脫水，循環障礙及白細胞大量減少。該病具有高度傳染性，主要感染1歲以內幼貓，發病率和死亡率均很高。1928年Verge首次鑒定出該病毒，之后在加拿大、美國、日本等許多國家都有發現，我國在1984年首次分離到該病毒，之后張振興和李剛等人報道在河北、河南、浙江等地均有貓細小病毒病的發生。該病在世界上廣泛存在，被認為是貓重要的傳染病之一。

現市面上疫苗生產多采用轉瓶或紙片載體生長，因此生產的抗原有限。隨著獸用疫苗生產發展自動化、規模化的需求，無載體全懸浮細胞培養技術成為新的發展趨勢。生物反應器細胞全懸浮培養技術中，細胞生長不再受載體限制，省掉了載體培養消化等步驟，細胞培養更為簡單，更有先行化放大的優選，適于工業化大規模生產。專利CN200810154578.7中公開了豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉和豬輪狀病毒的三聯疫苗，將已長成90％單層的宿主細胞系分別接種豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒，并加入細胞維持液，在37℃下培養；該專利所用的宿主細胞為貼壁細胞，而貼壁細胞生長時間有限，所能制備的抗原也受限，且滴度不穩定，造成疫苗的穩定性差。

目前臨床上，貓只多發生這三種疾病混合感染，混合感染后癥狀較重，主要采用注射疫苗進行預防。由于近年來多出現病毒變異株，市面上的疫苗不能很好的起到保護作用，急需新的流行毒株疫苗的產生。而現有用于制備疫苗的毒株毒力弱、抗原TCID₅₀值低，抗原水平低肯定影響疫苗的免疫效果，因為滅活疫苗接種到動物體內后，需要靠抗原來刺激機體產生免疫反應，最終形成抗體，抗原含量不夠直接影響免疫反應的強弱，最終導致產生抗體少，水平低。

發明內容