[發明專利]抗MET和RON雙特異性抗體及其抗體-藥物偶聯物的制備和應用

在審

• 申請號: 202010562324.X
• 申請日: 2020-06-18
• 公開（公告）號: CN111675763A
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發明（設計）人: 王明海;姚航平
• 申請（專利權）人: 美國德州精準藥靶有限公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C07K16/28;C12N15/13;A61K47/68;A61K39/395;A61K38/07;A61P35/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 朱瑩瑩

本發明屬于生物制藥領域，更具體地說，涉及抗MET和RON雙特異性抗體及其抗體?藥物偶聯物的制備方法和應用。一種抗MET和RON的雙特異性抗體，其包含抗MET的抗體片段和抗RON的抗體片段，抗MET的抗體片段和抗RON的抗體片段通過特定的化學“凸點?嵌入?凹穴”(knobs?and?holes)相連接。

技術領域

本發明屬于生物制藥領域，更具體地說，涉及抗MET和RON雙特異性抗體及其抗體-藥物偶聯物的制備方法和應用。

背景技術

肝細胞生長因子受體(MET)和巨嗜細胞刺激蛋白受體(RON)屬于受體型酪氨酸激酶的一個獨特的亞家族，他們具有相似的結構和功能。自從Met和RON分別在1987年和1993年被發現以來，他們在癌癥中的作用已經在各種模型系統中被研究，包括遺傳、轉錄組學、蛋白質組學和腫瘤微環境，這些研究表明了它們在腫瘤起始、進展、惡性和干性中的重要性。病理上，MET和/或RON的表達增加存在于各種類型的癌癥中，包括結直腸癌、乳腺癌、肺癌和胰腺癌。MET和RON在原發性腫瘤中的過度表達也與病理生理參數相關，可作為預測患者生存和化療反應的生物標志物。在細胞水平上，異常的MET和/或RON激活可以促進癌細胞侵襲生長、遠處轉移、化療耐藥和致瘤干性。這些活動通過不同的細胞內信號通路傳導，如絲裂原活化蛋白激酶和磷脂酰肌醇3激酶通路。根據這些發現，MET和RON被認為是腫瘤發生的關鍵決定因素。此外，兩種受體均已被證實可作為治療具有MET和/或RON表達和信號改變的癌癥的藥物靶點。

MET和RON靶向治療的臨床應用一直在深入研究中。小分子激酶抑制劑(SMKIs)和治療性單克隆抗體(TMAB)都已被開發出來。幾種SMKI，如Cabozantinib和Crizotinib，已被FDA批準用于臨床。由于MET和RON在結構上具有相似性，幾乎所有靶向MET的SMKI也同樣對RON有特異性。針對MET的TMAB，如ABT-700，SAIT301和Sym015，目前正在進行臨床試驗。同樣還開發了針對RON的TMAB，例如IMC41A10、ZT/f2、6E6和narnatumab。Narnatumab進行了臨床試驗，但由于缺乏治療效果而終止了。最近報道了一種使用針對MET和/或RON的抗體-藥物偶聯物(ADC)的策略。MET特異性ADC包括ABBV-399，TR1801-ADC和SHR-A1403等最近已進入臨床試驗(www.clinicaltrials.gov)。針對RON的ADC，如ZT/G4-單甲基瑞奧西汀E(ZT/G4-MMAE)和PCM5B14-DCM(PCM5B14-DCM)等也已被報道。累積結果表明，抗MET和抗RON ADC在靈長類動物體內均能有效地抑制和/或根除由不同類型的癌細胞株介導的異種移植瘤，并具有良好的藥代動力學特征和可控的毒理活性。顯然，這些發現奠定了抗MET和抗RON ADC作為癌癥治療新策略的基礎。

近幾年，國內在ADC藥物的研發上有了長足的進步。多家科研單位和藥物企業分別針對不同的藥物靶點，采用特異性單克隆抗體積極地開展新型抗癌藥物ADC的研發。抗體偶聯藥物的成功開發依賴于選擇合適的抗原靶點,使該類藥物的抗體部分可以與之特異性高活性結合,新靶點抗原應在腫瘤中的表達水平較高,在正常組織中的表達很少或不表達,或僅在特定組織類型中有表達,以提高藥物的安全性和有效性。雙特異性抗體又稱為雙功能抗體，是近年來腫瘤基因治療的又一個研究熱點。它有兩個抗原結合部位,可分別結合兩種不同的抗原表位。

本發明在羅氏公司的crossmab技術在Knobs-into-holes(KiH)方案的基礎上，進一步解決了輕鏈錯誤聯結的問題，簡單的說，該技術首先在Fc區設計了特定的化學“凸點-嵌入-凹穴”(Knobs-into-holes)異源二聚體連結；同時將Fab區域的CH1和CL互換，以減少輕鏈錯配。

本發明RON和MET的雙重靶向優于單獨抑制任一靶點。RON和MET是可以作為ADC藥物合適的抗原靶點。通過CrossMab技術構建的抗MET和RON雙特異性抗體將有助于腫瘤特異性靶向治療。

發明內容