[發明專利]用于檢測退變椎間盤微血管形成的生物標志物及其檢測方法

有效

• 申請號: 202010561386.9
• 申請日: 2020-06-18
• 公開（公告）號: CN113820500B
• 公開（公告）日: 2023-08-11
• 發明（設計）人: 郭寅龍;閃亮;史建剛;徐錫明;張菁;蘇越
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海有機化學研究所;上海中醫藥大學;上海長征醫院
• 主分類號: G01N33/72
• 分類號: G01N33/72;G01N33/68;C12Q1/6883;G01N27/62
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 張璐;徐迅

本發明涉及兩種用于分析退變椎間盤微血管形成的標志物和檢測方法。這兩種標志物是血紅蛋白及其輔基血紅素。本發明的有益效果在于首次發現血紅蛋白和血紅素在人退變椎間盤組織中的表達豐度顯著高于在正常椎間盤組織中的表達，本發明提供了一種從血管性改變的角度理解椎間盤退變的新思路(傳統的觀點多集中于椎間盤的鈣化和纖維化過程)，并為此提供了兩種可靠的生物標志物。

技術領域

本發明涉及生物醫藥檢測技術領域，具體涉及一種用于檢測退變椎間盤微血?管形成的生物標志物及其檢測方法。

背景技術

椎間盤各部分(髓核、纖維環及軟骨終板)的生理性退變(degeneration)是椎?間盤退行性疾病發生的根源。椎間盤是人體最大的無血管封閉結構，正常成人?的軟骨終板和纖維環通過滲透這種特殊方式向髓核提供營養，隨著年齡的增?長，軟骨終板鈣化的進行性發展導致椎間盤營養發生障礙，從而啟動椎間盤的?退變進程。因此，探索椎間盤退變的生物標志物(biomarker)以及其中的機制是?脊柱外科的重要研究方向，具有重大的科學意義和深遠的應用前景。

臨床病理學家早已觀察到椎間盤退變過程存在“微血管形成”的現象。新生?兒椎間盤軟骨終板及纖維環內均可見豐富的血管，出生后血管管腔被細胞外基?質填充而逐漸閉塞。隨著年齡增長，椎間盤內的微血管逐漸退化至終板和纖維?環外層，至成人階段椎問盤成為人體最大的無血管封閉組織，其營養供應依賴?于軟骨終板和纖維環的滲透作用。在椎間盤的退變過程中，髓核發生裂解和皺?縮，椎間盤內又再一次出現微血管形成，成為椎間盤退變的一種特征性的病理?改變。椎間盤內微血管形成可能是椎間盤損傷后的一種修復過程，同時具有促?進退變的作用。

然而，醫學界對退變椎間盤微血管形成的研究還相當有限，更沒有發現任何?一種可靠的生物標志物來預測退變椎間盤內是否有微血管形成。

因此，本領域迫切需要開發一種針對椎間盤退行性疾病的患病風險評估方法?和診斷方法。

發明內容

本發明的目的就是提供一種針對椎間盤退行性疾病的患病風險評估方法和?診斷方法。

本發明的另一目的是提供一種用于檢測退變椎間盤微血管形成的方法。

在本發明的第一方面，提供了一種生物標志物集合的用途，用于制備一試劑?盒，所述的試劑盒用于：(I)評估待測對象的椎間盤退行性疾病的患病風險，和/?或(II)待測對象的椎間盤退行性疾病的診斷；

其中，所述的集合中包括選自下組的生物標志物：血紅蛋白、輔基血紅素，?或其組合。

在另一優選例中，所述的試劑盒用于：

(i)檢測待測對象的椎間盤組織微血管生成；

(ii)診斷待測對象的椎間盤退變；和/或

(iii)對椎間盤退行性疾病的臨床病理分級鑒定。

在另一優選例中，所述生物標志物集合還包括：血管內皮標志物。

在另一優選例中，所述的血管內皮標志物為CD31。

在另一優選例中，所述試劑盒中包括：對所述集合中的各生物標志物具有特?異性的結合分子、特異性抗體、特異性擴增引物、特異性探針或芯片、同位素、酶?-底物復合物，或其組合。

在另一優選例中，所述試劑盒中包括：(i)血紅蛋白的特異性結合分子、血紅?蛋白的特異性抗體、特異性擴增引物、探針或芯片，或其組合；和/或(ii)血紅素的?特異性探針、血紅素過氧化物酶活性檢測試劑，或其組合。

在另一優選例中，所述的評估或檢測包括步驟：

(a)提供一來源于待測對象的待測樣品，對樣品中所述集合中各個生物標記物?的水平進行檢測；