[發(fā)明專利]靶向線粒體負(fù)載circRNA的納米材料及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010560444.6
• 申請日: 2020-06-18
• 公開（公告）號: CN111701031B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蘇士成;許小丁;劉嘉煜
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院
• 主分類號: A61K47/62
• 分類號: A61K47/62;A61K47/60;A61K31/7088;A61K49/00;C12N15/85;B82Y5/00
• 代理公司: 福州科揚專利事務(wù)所(普通合伙) 35001
• 代理人: 吳嘉濱

1.靶向線粒體負(fù)載circRNA的納米材料，其特征在于：所述納米材料為線粒體靶向肽和circRNA過表達(dá)載體通過電荷吸附后成為核心的納米顆粒，納米顆粒表面共價連接有pH響應(yīng)聚合物；

其中，線粒體靶向肽的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

所述靶向線粒體負(fù)載circRNA的納米材料的制備方法，包括如下步驟：

(1)合成pH響應(yīng)聚合物Meo-PEG-b-PDPA和線粒體靶向肽；

(2)合成circRNA，并將其克隆到circRNA的過表達(dá)載體pcD-ciR中合成circRNA過表達(dá)載體；

(3)將經(jīng)過步驟(1)合成的Meo-PEG-b-PDPA溶解在二甲基甲酰胺中，形成均相溶液；

(4)將經(jīng)步驟(2)合成的circRNA過表達(dá)載體溶于去離子水中形成circRNA過表達(dá)載體水溶液；同時將經(jīng)過步驟(1)合成的線粒體靶向肽溶于二甲基亞砜中形成線粒體靶向肽二甲基亞砜溶液；

(5)將經(jīng)過步驟(4)制得的circRNA過表達(dá)載體水溶液和線粒體靶向肽二甲基亞砜溶液混合后，再與Meo-PEG-b-PDPA均相溶液混合；混合液經(jīng)強力攪拌均勻后，將混合液滴加到去離子水中，最終形成負(fù)載有circRNA的靶向線粒體納米顆粒；

(6)將經(jīng)過步驟(5)形成的負(fù)載有circRNA的靶向線粒體納米顆粒轉(zhuǎn)移至超濾裝置中，離心去除有機(jī)溶劑和游離化合物，然后用超純水洗滌，最后用超純水定容至1mL。

2.如權(quán)利要求1所述的靶向線粒體負(fù)載circRNA的納米材料，其特征在于：所述步驟(3)中均相溶液的濃度為10mg/mL。

3.如權(quán)利要求1所述的靶向線粒體負(fù)載circRNA的納米材料，其特征在于：所述步驟(4)中circRNA過表達(dá)載體水溶液的濃度為1mg/mL；所述線粒體靶向肽二甲基亞砜溶液的濃度為5mg/mL。