[發(fā)明專利]用于細胞破碎和/或回收生物分子的微粒

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010556781.8
• 申請日: 2014-08-25
• 公開（公告）號: CN111875665A
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: R·哈恩;A·章格鮑爾;A·特列菲洛夫
• 申請（專利權(quán)）人: 貝林格爾·英格海姆RCV兩合公司;山德士股份公司
• 主分類號: C07K1/18
• 分類號: C07K1/18;C07K1/14;C12N1/06
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11382
• 代理人: 張偉;丁磊

1.帶負電荷的微粒用于從生物流體中獲得多肽的用途，其中所述帶負電荷的微粒為磨碎的聚合的陽離子交換樹脂。

2.權(quán)利要求1所述的用途，其中所述陽離子交換樹脂為聚苯乙烯基的、甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)基的、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯(DMAEMA)基的、聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯(pDMAEMA)基的、聚丙烯酰胺基的、甲基丙烯酸(MAA)基的。

3.權(quán)利要求2所述的用途，其中所述陽離子交換樹脂為以二乙烯基苯交聯(lián)的聚苯乙烯。

4.權(quán)利要求1所述的用途，其中所述微粒的平均粒徑小于5μm。

5.權(quán)利要求1所述的用途，其中所述帶負電荷的微粒能夠通過研磨聚合的陽離子交換樹脂獲得。

6.權(quán)利要求1所述的用途，其中所述陽離子交換樹脂為Amberlite IRC-748、Dowex 50WX2-100、Dowex 50 WX8-100、Marathon MSC或DIAION SK 110。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述生物流體為細胞懸浮液、細胞裂解液或細胞勻漿。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其中所述細胞為真核細胞或原核細胞。

9.一種從生物流體中獲得多肽的方法，包括：a)將權(quán)利要求1至8中任一項所定義的帶負電荷的微粒加入至生物流體中，并從所述生物流體中回收所述多肽。

10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，進一步包括：b)允許所述微粒形成絮凝物；c)從所述生物流體中去除所述絮凝物，以及d)從所述絮凝物中解吸所述多肽。

11.根據(jù)權(quán)利要求9或10的方法，其中所述生物流體為細胞懸浮液、細胞裂解液或細胞勻漿。

12.一種破壞細胞的方法，包括向生物流體中加入帶負電荷的微粒，其中所述帶負電荷的微粒為磨碎的聚合的陽離子交換樹脂。

13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所述生物流體為細胞懸浮液、細胞裂解液或細胞勻漿。

14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，進一步包括從所述細胞中釋放多肽。

15.帶負電荷的微粒用于細胞破碎的用途，其中所述帶負電荷的微粒包含磨碎的聚合的陽離子交換樹脂，和其中所述細胞破碎不包括細胞結(jié)構(gòu)如細胞壁的完全碎裂。

16.一種產(chǎn)生目的多肽的方法，包括：

(a)在生物流體中培養(yǎng)產(chǎn)生目的多肽的宿主細胞，得到細胞懸浮液；

(b)向(a)中所述細胞懸浮液中加入為磨碎的聚合的陽離子交換樹脂的帶負電荷的微粒，以破碎細胞；和

(c)從所述細胞懸浮液中回收所述目的多肽。

17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，進一步包括純化所述目的多肽、修飾所述目的多肽和/或制備包含所述目的多肽的藥物制劑的步驟。